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* * 7 发酵工艺控制 微生物把原料在合适的条件下经特定的代谢转变成所需产物的过程(广义)。 发酵的定义： 厌氧条件下葡萄糖酵解生成乳酸或乙醇的过程(生化)。 发酵是一复杂生化过程，影响因素很多： 菌种的生产性能 培养基的组成 原料的质量 灭菌条件 种子的质量 发酵条件(过程控制) 掌握发酵工艺控制的基本知识的重要意义： 发酵是一门艺术，需要经验 发酵生产受许多因素制约，即使同一生产菌种和培养基配方，不同厂家的生产水平也不一定相同。 菌种生产性能越高，生产条件越难满足。高产菌对工艺条件更敏感，掌握其代谢规律和发酵调控有重要意义。 微生物发酵过程： 发酵过程技术原理 分批发酵 补料分批发酵 半连续发酵 连续发酵 分批发酵的基础理论 分批发酵是一种准封闭式系统，种子接种到培养基后除了气体流通外发酵液始终留在生物反应器内。 基质的消耗速度： 过程反应速度的描述 基质的消耗比速： (g.L-1.s-1) (h-1、s-1) 单位时间内单位菌体消耗基质或形成产物（菌体）的量称为比速，是生物反应中用于描述反应速度的常用概念 S（底物） ─→ X（菌体） ＋ P（产物） 基质的消耗比速： (h-1) 菌体的生长比速： 产物的形成比速： (h-1) (h-1) 过程反应速度的描述 S（底物） ─→ X（菌体） ＋ P（产物） （7－1） （7－2） （7－3） dX/dt＝μX dS/dt＝－qsX dP/dt=qpX X： 菌体浓度，g／L； t：培养时间，h； μ：比生长速率，h－1； S：基质浓度，g／L； qs：比基质消耗速率，g／(g*h)； P： 产物浓度，g／L； qp：比产物形成速率，g／(g·h)。 物料衡算： 也可细分为六期： 一些微生物的典型μmax值: 根据产物的形成是否与菌体生长同步关联，Pirt将产物形成动力学分为生长关联型和非生长关联型。 初级代谢产物?? 次级代谢产物?? 生长关联型 与生长有联系的产物的形成可用得率YP/x表示： dP/dX=Yp/x dP/dt=Yp/x?dX/dt dP/dt=Yp/x?μX qp=Yp/x? μ Yp/x为以生长为基准的产物得率 qp:比产物生成速率 与生长关联产物:比产物形成速率随比生长速率的增长而增长。 如:根霉(脂肪酶)，树状黄杆菌(葡萄糖异构酶) 产物形成只与细胞的积累量有关，与菌的生长速率无关。 dP/dt：产物生成速率，g／(L·h)； β：比例常数 非生长关联型 次级代谢产物中一些抗生素的合成即属此类。 在浓度较低的范围内，静止期细胞浓度与初始基质浓度成正比： S0：初始基质浓度，g/L； St： 经培养时间t的基质浓度； Y： 得率系数，g细胞/g基质。 分批培养中的重要参数——基质浓度 生长停止时，St=0，可预测用多少初始基质能得到相应菌量。 菌进一步生长受积累的有害代谢物限制。 Monod研究了基质浓度与生长速度的关系 ———Monod方程(1949) μ 米氏方程: μ：菌体的生长比速 S：限制性基质浓度 Ks：半饱和常数 μmax: 最大比生长速度 μ 单一限制性基质：就是指在培养微生物的营养物中，对微生物的生长起到限制作用的营养物。