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第十二章 酵母基因工程 1974 Clarck-Walker和Miklos发现在多数酿酒酵母中存在质粒。 1978 Hinnen将来自一株酿酒酵母的leu2基因导 入另一株酿酒酵母，弥补了后者leu2的缺陷，标 志着酵母表达系统建立 1981 Hitzeman用酿酒酵母成功表达人IFN。 1983 我国首次用酵母菌表达HBV HBsAg基因。 1996 完成第一个真核生物--酿酒酵母全基因组测序 一、酵母菌作为外源基因表达受体菌的特征 酵母菌(Yeast)是一群以芽殖或裂殖方式进行无性繁殖的单细胞真核生物。 二、酵母菌表达外源基因的优势： 全基因组测序，基因表达调控机理清楚，遗传操作简便。 具有真核生物蛋白翻译后加工修饰系统。 大规模发酵工艺简单、成本低廉。 不含特异性病毒、不产毒素，被美国FDA认定为安全的基因工程受体系统。 能将外源基因表达产物分泌至培养基中。 不足之处 产物蛋白质的不均一、信号肽加工不完全、内部降解、多聚体形成等 幻灯片 7 解决内部降解的方法 在培养基中加入富含氨基酸和多肽的蛋白胨或酪蛋白水解物； 将培养基的pH值调成酸性，以抑制中性蛋白酶的活性； 利用蛋白酶缺失酵母突变体进行外源基因的表达。 幻灯片 5 第二节 常用酵母表达系统 一、酿酒酵母(Saccharomyce