高三生物《多聚酶链式反应扩增DNA片段》讲义.ppt

①准备好PCR反应体系的配方 ②用微量移液器按配方在微量试管中加入各组分 ③盖严盖子，用手指轻轻弹击管壁 二、实验步骤 ①准备好PCR反应体系的配方 ②用微量移液器按配方在微量试管中加入各组分 ③盖严盖子，用手指轻轻弹击管壁 ④离心10分钟 二、实验步骤 ①准备好PCR反应体系的配方 ②用微量移液器按配方在微量试管中加入各组分 ③盖严盖子，用手指轻轻弹击管壁 ④离心10分钟 ⑤将离心管放入PCR仪上，设置好循环程序 二、实验步骤 ①准备好PCR反应体系的配方 ②用微量移液器按配方在微量试管中加入各组分 ③盖严盖子，用手指轻轻弹击管壁 ④离心10分钟 ⑤将离心管放入PCR仪上，设置好循环程序 ⑥电泳检测PCR结果 二、实验步骤 　　1．为避免外源DNA等因素的污染，PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌。 　　2．PCR所用的缓冲液和酶应分装成小份，并在-20℃储存。使用前，将所需试剂从冰箱拿出，放在冰块上缓慢融化。 三、操作提示 　　3．在微量离心管中添加反应成分时，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头都必须更换。所有的成分都加入后，盖严离心管口的盖子，用手指轻轻弹击管的侧壁，使反应液混合均匀，再将微量离心管放在离心机上，离心约10s，使反应液集中在离心管底部，再放入PCR仪中进行反应。 目的： 　　避免外源性DNA大量扩增造成假阳性反应。 1、