原花青素对狗离体冠状血管的影响在药理学范畴的研究.docxVIP

原花青素对狗离体冠状血管的影响在药理学范畴的研究 【摘要】目的：研究原花青素在狗冠状动脉上舒张特征和机制。方法：制备 狗冠状动脉血管环，固定于盛有K?H液的恒温肌槽内，并观察等长吋血管张力 的变化。结果：原花青素使KC1及无钙中CaC12量效曲线明显右移，使肌条敏感 性和最大收缩反应明显降低。原花青素可使KC1预收缩冠状动脉血管环产生明 显的舒张作用，N(o-L-硝基精氨酸、甲烯兰及去内皮细胞组，可部分阻断17卩■雌 二醇的舒张作用。结论：原花青素具有内皮依赖性和非内皮依赖性的舒血管效应, 前者的作用机制与NO和NO?cGMP途径相关，而后者可能是由于原花青素对血 管的直接作用引起，即抑制电压依赖性的钙通道。 【关键词】原花青索；冠状血管-血管张力；内皮细胞；电压依赖性钙通道 1947年，法国科学家杰克#8226;麦斯凯利博士首次于花生壳中分离原花青 素(Procyanidins, PCs),后证实它广泛存在于植物屮，是一大类多酚类化合物 的总称，在抑制肿瘤、防癌抗癌、降脂[1, 2]、抗凝血，防治心脑血.管疾病常作 为植物药源，近年研究集中于原花青素具有抑制亚硝基化、捕获和强效清除口由 基的特性[3],可使致癌物和致突变物发生变性，也被认为是降低心脑血管疾病 的发生和发展的关键所在，但这似乎不能令人信服，鉴于潜在的机制还未彻底研 究清楚，因此，本实验从调节血管张力的角度出发，以血管张力变化为指标，进 行相关性研处有一定的现实意义。 1材料和方法 1.1 药品：Ncd-L-硝基精氨酸(Nco-L-nitro-arginine, L-NNA),前列腺素 F2a (Prostaglandin F2a, PGF2a)和缓激肽等药物购自Sigma公司；原花青素 (procyanidins, PCs)购自天津市康友天然色素厂;甲烯兰(Methylene blue, MB上海润捷化学试剂自限公司)，上述拔品一律用双蒸水溶解配置。 1.2标本制备：把狗心放在冰冷的Kiebs-Henseleit (K-H)液中从屠宰场取冋 o 改良液成分如下(mmol/L： 118.3 gNaCl, 4.7gKCl, 1.2gMgSO4, 1.22 g KH2PO4, 2.5gCaC12, 25.0 g NaHCO3和11葡萄糖)。扌各狗冠状动脉左前降 支分离并剪下，制成3 mm的血管环，用不锈钢挂钩固定悬挂于盛有K?H改良液 的37°C恒温肌槽内，持续通入95%02和5%CO2的混合气体。另一端挂钩连接 张力换能器(JH-2,北京航天医学工程研究院)，通过BL?420智能型生物信号显 示与处理系统(成都泰盟电子有限公司)来记录等长收缩时张力的变化。 1.3实验方法：血管环平衡l?5h,期间给予血管环2.0 g的张力，20 min M 换1次K?H液。待平衡后，先用120 mmol#8226;L-l KC1诱导其收缩，激发钙 通道活性，收缩良好的血管环用于实验。部分血管环用棉签轻擦内皮而数次，去 除内皮。使用前列腺素F2a 10-5 mol#8226丄?1和10-6 mol#8226;L?1缓激肽检 验内皮去除情况，舒张值大于40%的血管环是内皮完整的血管环，内皮完全去除 的血管环不舒张或舒长值在10%以内（见图1）。待血管环收缩稳定后，可进行 如下实验： 1.3」PCs对二种血管激动剂量效曲线的影响：（1） PCs对KC1量效曲线的 影响：血管环（完全去内皮）温育平衡后，向浴槽屮累积加入KC1 （5?50） mmol#8226;L?l,建立量效曲线。用K-H液反复冲洗平衡后，分别加入1 mg#8226;L-1, 10 mg#8226;L-l, 20 mg#8226;L?1 PCs 温育 20 min 后，再重 新建立KC1量效曲线。（2） PCs对CaC12量效曲线的影响：血.管环（完全去内皮） 在无 Ca2+ K-H 液中温育 30 min,先加入 100 mmol#8226;L-1 KC1,打开 PDC, lOmin后,加入累积浓度为 10-4.5 mol#8226;L-l 10-4 mol#8226;L-1 10-3.5 mol#8226;L-l、10-3 mol#8226;L-1、10-2.5 mol#8226;L-1 和 10-2 mol#8226;L-l的CaC12,建立CaC12的量效曲线作为对照，冲洗平衡后，观察 10 mg#8226;L?1, 20 mg#8226;L?1 PCs 对 CaC12 量效曲线的影响。 1.3.2 PCs对KC1预收缩离体冠状血管环的舒张作用：血管环（内皮完整） 稳定后，向浴槽中加入50 mmol#8226;L-l KC1,待血管环收缩张力达高峰后， 用K?H液冲洗。然后，20 min换液1次，平衡30 mi