4蛋白质颜色反应与沉淀反应.ppt

* 蛋白质的颜色反应与沉淀反应 实验4 实验目的:掌握蛋白质的重要性质,学习鉴定蛋白质的基本原理,熟悉鉴定蛋白质的主要方法。 实验原理:蛋白质分子中的肽键、侧链氨基酸及其特定基团,可与某些显色剂作用产生特定颜色反应;蛋白质胶体溶液的稳定性受到各种理化因素(温度、搅拌、超声、中性盐、重金属及有机溶媒等)影响,发生不同程度的变性/复性或沉淀反应等。这些性质广泛地用于蛋白质分离提取纯化及定性定量分析。 实验试剂与器材:鸡蛋清(水稀释?倍后,纱布过滤液);尿素结晶,硫酸铵结晶,NaCl结晶;0.1%茚三酮溶液, 10% NaOH溶液,浓硝酸, 1%CuSO4溶液,95%乙醇,1% PbAc, 5%鞣酸溶液, 1% HAc,饱和硫酸铵溶液,饱和苦味酸溶液 电炉,500mL 烧杯(沸水浴),玻璃试管,25mL 量筒, 玻璃搅拌棒,刻度吸管,试管夹 1.颜色反应 1.1 双缩脲反应:(肽键检验) 试管1:加入尿素结晶 (~黄豆粒体积) 直火加热 致管内出现白色固体 现象?管口pH试纸检测? 冷却至室温,加10%NaOH 1 mL ,混匀; 加 1% CuSO4 2 d 试管2:蛋白质液10d 观察记录现象? 实验操作与现象观察 1.2 黄色反应:(侧链芳环检验) 沸水浴加热 现象? 试管:加 蛋白质液10d,加浓硝酸3d 观察记录现象? 实验操作与现象观察 冷却至室温,加10%NaOH

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