第15章蛋白质生物合成-中药11.pptVIP

第15章 第一节参与蛋白质合成的主要物质 遗传密码表 从简单的病毒到高等的人类，几乎使用同一套遗传密码，因此，遗传密码表中的这套“通用密码”基本上适用于生物界的所有物种，具有通用性。 密码的通用性进一步证明各种生物进化自同一祖先。 已发现少数例外，如动物细胞的线粒体、植物细胞的叶绿体。 第二节氨基酸的活化（负载） 氨基酸与特异的tRNA结合形成氨基酰-tRNA的过程称为氨基酸的活化。 参与氨基酸的活化的酶：氨基酰-tRNA合成酶。 tRNA与酶结合的模型 三、原核与真核生物的起始氨基酰-tRNA 第三节大肠杆菌蛋白质的合成 翻译时，从mRNA的起始密码子AUG开始，按5ˊ→3ˊ方向逐一读码，直至终止密码子。于是，合成中的肽链从起始甲硫氨酸开始，从N-端→C-端延长，直至终止密码子前一位密码子所编码的氨基酸。 起始(initiation) 延长(elongation) 终止(termination ) 原核生物mRNA在核蛋白体小亚基上的准确定位和结合涉及两种机制： 在各种mRNA起始AUG上游约8～13核苷酸部位，存在一段由4～9个核苷酸组成的一致序列，富含嘌呤碱基，如-AGGAGG-，称为Shine-Dalgarno序列(S-D序列)，又称核蛋白体结合位点(ribosomal binding site, RBS)。 mRNA序列上紧接S-D序列后的小核苷酸序列，可被核蛋白体小亚基蛋白rpS-1识别并结合。 指在mRNA模板的指导下，氨基酸依次进入核糖体并聚合成多肽链的过程。 第四节蛋白质的翻译后修饰 新生多肽链不具备蛋白质的生物学活性，必须经过复杂的加工过程才能转变为具有天然构象的功能蛋白质，这一加工过程称为翻译后修饰(posttranslational modification)。 翻译后修饰包括多肽链折叠为天然的三维构象及对肽链一级结构的修饰、空间结构的修饰等。翻译后修饰使得蛋白质组成更加多样化，从而使蛋白质结构上呈现更大的复杂性。 蛋白质合成后被定向输送到其发挥作用的靶位点的过程称为蛋白质的靶向输送(protein targeting)。 三、肽链折叠和亚基装配 细胞中大多数天然蛋白质折叠都不是自动完成，而需要以下酶和蛋白质辅助。 第五节真核生物蛋白质的靶向输送 第六节蛋白质生物合成的抑制剂 蛋白质生物合成是很多天然抗生素和某些毒素的作用靶点。 可利用蛋白质生物合成体系设计药物 针对蛋白质生物合成必需的关键组分 利用真核、原核生物蛋白质合成体系的任何差异 二、其他干扰蛋白质生物合成的物质 是真核细胞蛋白质合成的抑制剂，它作为一种修饰酶，可修饰真核生物的延长因子，使之失活。 白喉毒素的作用机理： 2．蓖麻蛋白(ricin) 作用于真核生物核蛋白体大亚基的28S rRNA，催化其中特异腺苷酸发生脱嘌呤基反应，使28S rRNA降解，使核蛋白体大亚基失活. 多聚核糖体的形成可以使蛋白质生物合成以高速度、高效率进行。 四、多核糖体循环 1条mRNA模板链可附着10～100个核蛋白体，这些核糖体依次结合起始密码子并沿5′→3′方向读码移动，同时进行肽链合成，这种mRNA与多个核糖体形成的聚合物称为多聚核糖体(polysome) 。 多聚核糖体 电镜下的多聚核糖体 一、肽链部分切除 二、个别氨基酸的修饰 1．糖基化 2．羟基化 3．甲基化 4．磷酸化 5．二硫键形成 6．亲脂性修饰 分子伴侣 (molecular chaperon) 蛋白质二硫键异构酶 肽-脯氨酰顺反异构酶 通过非共价键亚基聚合形成具有四级结构的蛋白质 辅基连接后形成完整的结合蛋白质 蛋白质在核蛋白体上合成后，必须分选出来，定向输送到一个合适的部位才能行使各自的生物学功能。蛋白质的靶向输送与翻译后修饰过程同步进行。 Man-6-P（甘露糖-6-磷酸） 溶酶体蛋白 C端-Ser-Lys-Leu-（SKL序列） 过氧化物酶体蛋白 核定位序列（-Pro-Pro-Lys-Lys-Lys-Arg-Lys-Val-，SV40 T抗原） 核蛋白 N端靶向序列（20～35氨基酸残基）,如导肽 线粒体蛋白 N端信号肽，C端-Lys-Asp-Glu-Leu-COO-(KDEL序列) 内质网腔蛋白 N端信号肽(13-36氨基酸残基) 分泌蛋白 信号序列或成分 靶向输送蛋白 靶向输送蛋白的信号序列或成分 分泌蛋白的靶向输送 真核细胞分泌蛋白等前体合成后靶向输送过程首先要进入内质网。 1、信号肽(signal peptide) 各种新生分泌蛋白的N端有保守的氨基酸序列称信号肽。 2、信号识别颗粒及其受体 信号肽引导真核分泌蛋白进入