6章DNA的损伤与修复.ppt

第六章 DNA的损伤与修复 DNA的复制是高保真的，但在有少量错误；理化因素损害。如不纠正，可导致突变/死亡。 第一节 DNA损伤的来源 （包括碱基脱落、碱基改变、碱基错配、链交联及断裂等） 一、碱基脱落 1、酸和热→糖苷键→碱基脱落， 2、变异的碱基被DNA糖基化酶切除去，产生无嘌呤/嘧啶的位点（AP位点）； 3、生理情况碱基会自发性脱落。 二、碱基改变 理化因素导致嘧啶间替换，或嘌呤间替换 1、烷化剂：硫酸二甲酯、甲烷磺酸甲酯等烷化剂与碱基中的亲核基团作用生成烷基化碱基，使链内或链间的胞嘧啶交联，阻断复制、转录等过程。 2、亚硝酸： 甲基化的胞嘧啶→脱氨→T，与A 配 胞嘧啶→脱氨→U，与A 配 3、碱基类似物：5-溴尿嘧啶（Br-U）的酮式与T相似，可与A配对；变为醇时则与C相似，也能与G配对，结果使A：T→G：C 2-氨基嘌呤为A的类似物，正常时与T配，但也可与C配，使原AT对转换为GC对 ----------A--------- ---------G---------- ----------T--------- --------- U---------- --------------A------------ ------------- U------------ --------------G------------ --------------C------------ ---------G--------- ----------A---------- ---------C--------- ----------U---------- 亚硝酸 亚硝酸： GC对变AT对 : G 5-BrU（B）的醇式，与G配 Br OH H O 5-BrU的酮式，与A配 : A Br H O AGCTBCCTA TCGAGGGAT AGCTTCCTA TCGAAGGAT 1st round of replication AGCTBCCTA TCGAAGGAT AGCTCCCTA TCGAGGGAT 2nd 碱基类似物： AT对变GC对 AGCTTCCTA TCGAAGGAT AGCTBCCTA TCGAAGGAT Base analog incorporation : G 5-BrU的醇式，与G配 Br OH H O 5-BrU的酮式，与A配 : A Br H O 三、碱基的错配：由突变基因编码有缺陷的聚合酶，核酸酶或其它蛋白质，易导致碱基发生错配。 1、碱基的缺失、插入：吖啶类、溴乙锭等为扁平分子，易嵌入DNA的碱基平面间，致使复制、重组过程中碱基的缺失或插入。原因：使聚合酶在复制过程中发生滑移，如在模板链滑移（打滑）易造成缺失，在生长链上易造成插入。 2、胸腺嘧啶二聚体：紫外线照射使一条链上相邻的嘧啶，尤其是胸腺嘧啶形成环丁基二聚体，阻碍链间的正常碱基配对。 四、链的断裂： 辐射、博莱霉素等，使单股或双股DNA的磷酸二酯键断裂、脱氧核糖裂解； 机体代谢产生氧自由基，使链断裂 五、DNA链的交联： 烷化剂、丝裂霉素、光活化补骨脂素等，使DNA链间交联 氮芥使二条链间的鸟嘌呤形成共价键 光敏植物（芹菜、芫荽、莴苣等）产“呋喃香亚素”，最有名的“补骨脂素”。分子量很小，可穿透皮肤到达DNA。紫外线照射后与DNA结合 第二节、DNA的修复系统 一、直接修复: 1、二聚T：几乎所有生物都有光复活酶（DNA光解酶），使嘧啶二聚体在可见光（300-600nm）存在下分解为单体。 机制：酶先与二聚T结合成复合物，复合物吸收可见光切断胸腺嘧啶二聚体之间的两个C-C键，使二聚T变为单体，酶释放。 （二聚T） 光复活酶 2、烷基化的碱基：在O6-甲基鸟嘌吟转甲基酶的作用下将O6-甲基鸟嘌吟上的甲基转移到酶分子上的半胱氨酸残基而修复。 包括2种： 碱基的切除修复 片段的切除修复 （二）切除修复 Base excision repair DNA glycosylases cleaves N-glycosylic bond AP endonuclease