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植物组织培养的培养基 定义:含一定营养成分,供组织培养植物生长的基质 无机营养成分:N,P,K等大量元素及部分微量元素Fe,Mn,B等 有机营养成分 ① 含N物质:包括维生素和氨基酸 ② 碳源:2%—4%的蔗糖,并调节渗透压 ③ 琼脂:起支持作用 ④ 生长调节物质:生长素,细胞分裂素和赤霉素 可以用干细胞 治疗的健康问题 截肢术 神经系统疾病 脊髓损伤 心脏疾病 烧伤 糖尿病 造血干细胞的分化 骨 造血干细胞 粒细胞 单核巨噬细胞 血小板 骨髓脂肪细胞 成骨细胞 肝细胞干细胞 骨骼肌肉干细胞 骨细胞 自然杀伤细胞 T淋巴细胞 B淋巴细胞 红细胞 造血干细胞* 骨髓移植捐献实际上就是移植捐献造血干细胞 20世纪五十年代,临床上开始用骨髓移植法来治疗血液系统疾病供者要进行全麻,或者在他的骨上凿几个洞 八十年代末,自体外周血干细胞移植技术逐渐推广,能提高治疗有效率和缩短疗程,效果令人满意 再次在脐带中直接采集胎儿的造血干细胞,与前两者相比,脐血干细胞移植对HLA配型要求不高,不易受病毒或肿瘤的污染 3.动物细胞融合技术 如人鼠融合细胞: 主要用于制备 单克隆抗体 获得杂种植株 用 途 物理、化学方法 (同左) 灭活的病毒 物理(离心、振 荡、电刺激) 化学(聚乙二醇) 诱导方法 细胞分散后诱 导细胞融合 去细胞壁后诱 导原生质体融合 细胞融合的方法 膜的流动性 膜的流动性、 细胞全能性 细胞融合的原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 比较项目 动植物细胞融合的比较 -----动物细胞融合技术最重要的用途 4.单克隆抗体技术 正常淋巴细胞(如小鼠脾细胞),具有分泌抗体的能力,但不能长期培养 瘤细胞(如骨髓瘤)可以在体外长期培养, 但不分泌抗体 1975年英国人Kohler和Milstein 将两种细胞杂交 而创立了单克隆抗体技术,获1984年诺贝尔奖 单:一个杂交瘤细胞 克隆:该细胞增殖分化为相同的细胞群 抗体:该细胞群产生的抗体。 特点:特异性强 灵敏度高 单克隆抗体制备 应用了哪些技术手段 5.其它细胞工程技术 为了帮助不孕夫妇,1978年诞生了世界上第一例试管婴儿; 为了证明高度分化的动物体细胞的核仍保持全能性,1997年第一只克隆动物多利问世。 前两者的生殖方式有何不同? 各利用了什么细胞技术? 受精卵 卵裂 早期胚胎 胚胎分割技术 代孕母牛 植入 植入 分割 还应用了哪些技术手段? 组织培养 体细胞杂交 动物细胞工程 单克隆抗体 细胞融合 细胞培养 胚胎移植 核 移 植 植物细胞工程 相互联系 * * 细胞工程 细胞工程 应用的原理和方法 研究的水平 研究的目的 细胞生物学和分子生物学 细胞水平 按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品 概念 分类 植物细胞工程 动物细胞工程 主要技术 植物组织培养 植物体细胞杂交 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体技术 胚胎移植 核移植 植物细胞工程技术 动物细胞工程技术 细胞分化原因? 所有细胞含全套基因 但表达的基因不同------分化的根本原因 使转录的mRNA不同 翻译成的蛋白质不同------分化的直接原因 导致细胞的形态、结构、功能不同 细胞的全能性 定义:生物体的细胞,具有使后代细胞发 育成完整个体的潜能。 原因:生物的每一个细胞都含有该物种所 特有的全套遗传物质。 全能性大小:受精卵>生殖细胞>体细胞 具有全能性一定能表现出全能性吗? 下列有关细胞全能性的含义,正确的是: A、每个生物体内的所有细胞都具有相同的功能 B、生物体内的任何一个细胞可以完成该个体的全部功能 C、生物体的每一个活细胞都具有发育成完整个体的潜能 D、 生物体的每个细胞都经过产生、分裂、分化、生长、衰老、死亡的全过程 植物细胞工程 1.植物组织培养技术 1.植物细胞表现出全能性的必要条件是什么? 2.在植物组培过程中,为什么要进行一系列的消毒、灭菌,并且要求无菌操作? 思考 细胞离体(外植体) 一定的营养物质、激素和其他外界条件 外植体、脱分化、再分化、愈伤组织 植物组织培养的过程——重点 外植体 愈伤组织 幼苗/胚状体 CTK/IAA比例适合 脱分化 再分化 CTK/IAA比例适合 组培应用 生产植物的次级代谢产物p42 培养终点? 快速繁殖无病毒植株p37 培养终点? 生产人工种子p42 培养终点? 胚 状 体 人工种皮 人工胚乳 花药的离体培养 人工种子 自然种子 胚 状 体 人工种皮 人工胚乳 胚 种皮 胚乳 紫草 紫草素
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