含菌冻干粉大肠菌群微生物不确定度.docxVIP

含菌冻干粉CC-149中大肠菌群MPN法结果不确定度的评定 通过分析影响食品中人肠菌群多管发酵法结果的不确定度來源，建立一种简单的人肠 菌群多管发酵法不确定度评定方法。结果表明，影响食品屮大肠菌群多管发酵法结果不确定 度的主要因素为取样量的不确定度、稀释倍数的不确定度、加样体积的不确定度、刀桂基硫 酸盐胰蛋白陈（LST）肉汤和煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤管产气比例产生的不确定度，英屮后两 者产生的不确定度所占分量比较大。 1 检验方法 依据?GB 4789.3-2010食品卫生微生物学检验大肠菌群计数》屮第一法大肠菌群MPN法 进行检验，流程如下： 25g样品+225ml无菌生理盐水+lml稀释过的大肠埃希氏菌液一10倍系列稀释—LST肉 汤36°C培养48h — BGLB肉汤36°C培养48h—计数产气数，杳MPN表报告结杲。 2各分量的不确定度 2?1样品制备称量过程中引入的不确定度（A类） 无菌条件下用精度为O.lg的电子天平称取样品25.0g,用250ml的量筒量取225ml无菌生理 盐水加入，根据电子天平检定证书给出的最大允差为0.1,量筒按JJG196-2006常用玻璃量 器的容量允差为5ml,由于按级使用的数字式仪表、测量仪器最大允差误差导致的不确定度 属于矩形（均匀）分布，则天平和玻璃容器的标准不确定度分别为： 卩山样）=^=0.0577g （V 样）= （V 样）= 2.0ml = 1.1547ml 相应地它们的相对不确定度分别为: U（m样尸口（ U（m样尸 口（m样）_0.0577gm 样 25g =0.0023 U（v惮尸 P（V样）_1.1547g v 样 225ml =0.0051 则该步产生的相对标准不确定度: u（取样戶 ^iM2+Uv^2 = Vo.OO232+O.OO512 =0.0056 2?2样品稀释过程中引入的不确定度（A类） 样品10倍系列梯度稀释采用1ml和10ml量出式分度吸量管进行。JJG196-2006常用玻璃量 器规定,20°C时lml和10ml （B级）的容量允差分别为±0.015和±0.1,取矩形分布，则它 们的标准不确定度分别为：卩（1-1）=^=0.00866.1 (10ml)=0.1/72/=0.05774ml (10ml)= 0.1/72/ =0.05774ml 相应地它们的相对标准不确沱度分别为: Ug严」叱=2^鲍丸. Ug严」叱=2^鲍丸.00866 vim/ lml u (10诙) vl 0ml _ 0,05774ml iomi - =0.005774 则该步产生的相对不确泄度U（稀释），可根据普送关于微生物培养产生的不确肚度疋量测肚 理论中的公式计算：U（稀释尸?2伽）+（/2（呗））?9^+9）2 =J（0.008662 +0.0057742）? %0 =0.009368 样品的5稀释方法相同，则9（总稀释）=kxU2（稀释），k为10倍系列梯度稀释次数，如第一 次取lml样液到9ml稀释液中相当于10倍，则k为1,以此类推。本次试验为倍的MPN 结果，则k为5,则U（总稀释）=J5P1稀释）=丁5?0.009368 =0.2164 本次试验在20°C标准温度的环境屮进行，因此，忽略溶液温度与校准时温度不同引起的不 确定度。若溶液温度不为标准温度时，则必须考虑温度对量器体积的影响。 2?3样品加样体积的相对标准不确定度（A类） 分别用lml分度吸量管取lml接种于LST培养基屮（每梯度3支），其产牛的： U（吸取）=U（imi）=0.00866 2.4 LST和BGLG肉汤管产气相对标准不确定度（A类） 同一样品重复测量10次，取其平均值作为测量结果。10次重复测量的结果列入表1中。 表1给出不确沱度评沱的全部计算过程。 具体计算过程如2 列出测量结果加(表1第2列); 取对数lgr?，得到对数lgt的平均值为：麻=4.0515 ； 求残差lg%?lgx ； 求残差的平方，得到残差平方和为 ^(lgx-lgx) 2=0.010343464 /=1 合成标准不确定度 测量结果为10次重复测量的平均值，故平均值的标准不确定度为: u （lgx）=5（ u （lgx）=5（lgx）= ^0.010343464 \ 10（10-1） =0.0107204 表1单一样品重复测量的计算过程 序号 R R R R m A 2 \JZ X ■ 览 znx m m E m m E m m E m m S m m m S S S S □ H □ □ 00 o 5 2 □ H □ □ 00 o 5 3 □ □ □ □ 00 3 9 4 S S S □ □ □ □ 00 3 9 5 S □ S □ S □ S n □ □ □ 00 3 9 6 S □ S □ S □