革兰氏涂片染色检测标准操作程序.docVIP

月亮县 中医院 项 目 文件编号：YCXZYYJYK_SOP_15 页码：第 2 -页，共 NUMPAGES 2页 检验科 临床微生物项目SOP手册 版本：第3版，第1次修订 生效日期PAGE 编写者：张三三 审核者：李四四 批准者：李四四 时 间时 间时 间SOP_15-15 革兰氏涂片染色检测标准操作程序 一、目的：统一项目操作规程，严格检验质量标准，为临床提供及时、可靠的结果报告。 二、适用范围：革兰氏涂片检测 三、操作人员：检验科授权工作人员 四、操作步骤 1、操作原理： 细菌等电点低，约在pH2～5， 一般情况下细菌带负电荷，易于被带正电荷的碱性染料（如亚甲兰、碱性复红、沙黄、结晶紫）着色。 2、试剂组成 ⑴革兰染液Ⅰ液（结晶紫溶液） ⑵革兰染液Ⅱ液（碘液） ⑶革兰染液Ⅲ液（95%酒精） ⑷革兰染液Ⅳ液（沙黄复染液）或稀释碱性复红液 3、染色步骤 ⑴、涂片 菌液涂片时，用接种环蘸取菌液点在载玻片上，标本可直接在玻片上涂布。菌落涂片时，先取生理盐水1滴，置玻片上，用接种针挑取菌落，在盐水中涂布。或取脓液、痰、分泌物直接涂片。有的标本或细菌增菌物在载物片上不易附着，常和少量无菌血清或蛋白溶液一起涂片。涂片时必须注意应轻轻操作。猛烈的动作会改变细胞原有的排列形式，或造成细菌鞭毛