12基因工程的基本操作程序lk.pptVIP

四、目的基因的检测与鉴定 四、目的基因的检测与鉴定 * 1.2 基因工程的基本操作程序 1）目的基因的获取 2）基因表达载体的构建 3）将目的基因导入受体细胞 4）目的基因的检测与鉴定 基因工程的四个基本步骤： 一、目的基因的获取 从基因文库中获取目的基因 利用PCR技术扩增目的基因 人工合成 目的基因是编码蛋白质的基因。 1.从基因文库中获取目的基因： 基因文库: 基因组文库: 部分基因文库: 将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因。 基因文库中包含了一种生物所有的基因. 基因文库中包含了一种生物的一部分基因。如cDNA文库。 2.利用PCR技术扩增目的基因 3.人工合成基因法 基因比较小，核苷酸序列已知。 二、基因表达载体的构建（核心） 1.目的： 使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可遗传给下一代，同时，使目的基因能表达。 2.组成： 目的基因 启动子 终止子 标记基因 3.构建方法 （1）用一定的限制酶切割质粒，使其出现一个切口，露出黏性末端。 （2）用同一种限制酶切断目的基因，使其产生相同的黏性末端。 （3）