人凝血因子分离纯化工艺分析讲义.pptVIP

人凝血因子分离纯化工艺分析 2 F Ⅷ F Ⅸ 3 人凝血因子Ⅷ是人血浆中一种非常重要的凝血因子，其缺失或缺乏会引起不同程度的甲型血友病——一种连锁隐性遗传的出血性疾病，严重时甚至会危及患者的生命。甲型血友病是一种终生性疾病，目前仍没有根治的方法，只能通过输注产品进行替代性治疗。 4 5 原材料：人新鲜冰冻血浆 主要杂质：人纤维蛋白原、人纤维结合蛋白、白蛋白、其他凝血因子等 6 关键步骤： 7 冷沉淀中所含杂质： 8 2. 乙酸缓冲液调节pH —— 等电点沉淀法 调节温度为15℃，pH6.3左右 去除等电点较高的人纤维白蛋白和人纤维结合蛋白 9 3.Al(OH)3 吸附 —— 吸附分离法 （负吸附） 使用Al(OH)3 作为吸附剂，通过预实验确定铝胶含量为12%。由于该吸附剂为两性离子，在pH7.1（预实验确定）左右时带正电，易于吸附小分子酸性蛋白，去除F Ⅸ、F Ⅱ、F Ⅶ、F Ⅹ 等 10 4. DEAE 650M 弱阴离子交换凝胶 —— 离子交换层析 固定层析过程为pH7.0,通过调节缓冲液盐浓度来改变蛋白结合能力，进行洗脱。 梯度洗脱方案： 11 12 5. 病毒灭活 （1）S/D处理法 灭活脂包膜病毒 （2）100℃ 30min 干热灭活法灭活非脂包膜病毒 谢谢您的观看与聆听 制作人：龙益如 班级：144092 The Preparation Proced