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第六章 基因的重组与转移 第一节 DNA片段的体外连接 二、齐平末端（blunt end）的连接 2. 人工加尾形成 “粘性末端” （2）衔接物(linker)连接 ③优点： （3）DNA接头 (adapter)连接法 三、PCR产物的连接 引物1 引物2 带酶切位点的PCR产物 2. 与T载体直接连接 四、DNA体外连接应注意的事项 （1）用相同的酶切 2. DNA插入的方向正确 3. 插入基因的开放阅读框（ORF）正确 4. 防止载体自身环化连接 五、载体和外源DNA插入片段的连接结果 第二节 重组体导入细菌细胞 2. 菌种 3. 制备原理 4. 制备过程 二、重组DNA导入大肠杆菌 2. 转化率 转化率是指DNA分子转化受体菌获得转化子的效率，有两种表示方式： 一是以转化子数与用于转化处理的DNA分子数或质量的比率表示； 二是以转化子数与用于转化处理的受体细胞数的比率表示。 用每单位质量的DNA分子获得的转化子数来表示，难以反映分子大小与转化率之间的关系。 （1）热休克法 （2）电转化法 4. 平板培养基培养细菌 5. 影响转化率的因素 （4）感受态细胞 （competent cells) 6. 体外包装的噬菌体的转导 （3）cI857基因突变的?噬菌体 （4） 互补型噬菌体 (5) 体外包装过程 （6） 转导 第三节