第3章细胞融合与单克隆抗体-2.pptVIP

3.2.3单克隆抗体的规模化生产 杂交瘤细胞直接植入动物体内： 1.将106-107的单克隆杂交瘤细胞，由皮下植入同系或组织相容正常的小鼠的体内，约过两周后，在小鼠的皮下形成相应的移植性肿瘤，用这些肿瘤再去接种更多的小鼠。 2.在肿瘤出现后的一段时期，通过多次采血得到含单克隆抗体的血清，每ml血清内约含1-10ml的抗体，但取血量有限。 3.因此，可将相同数量的单克隆抗体细胞植入在3-10天前经腹腔注射0.5ml异十八烷或其它矿物油的初次致敏的小鼠腹腔内。在接种后的二周左右的时间内，经穿刺而得到5-10ml的腹水，内含单克隆抗体的浓度5-20mg/ml 3.2 单克隆抗体技术 现在的生物技术公司一般采用生物反应器悬浮培养的方法生产单克隆抗体。由于杂交瘤细胞的高密度生长，使得抗体效价可达到10~100mg/ml。 美国Damon公司的专利方法是将细胞培养在一种中空的微球体内，这种被称之为微囊的微球体外面由多孔膜包裹，使内部生长的杂交瘤细胞受到多层保护而不受环境影响。此种微囊技术生产的抗体可达0.1-1g/L。抗体的生产达到一定的规模。 3.2 单克隆抗体技术 影响因素分析 （一）污染 （二）融合后杂交瘤不生长 PEG有毒性或作用时间过长 牛血清的质量差，用前未严格筛选 骨髓瘤细胞污染了支原体 HAT有问题（A过高或HT含量不足） 3.2 单克隆抗体技