可见和紫外吸光光度法3.ppt

2.4.1 显色反应的选择 2.4.2 显色反应条件的选择 此外，干扰情况，其他试剂的选择和加量等也是必须考虑的。 上述选择最佳条件的方法叫做“单因素变动法”或“孤立变量法”。 选择多因素实验的最佳条件的科学方法： “正交实验法”。 2.4.3 显色剂 显色剂为什么能使金属离子显色呢？ 当显色剂与金属离子与显色剂发生反应后，生成的络合物改变了显色剂分子内的电子云分布，使体系的能量降低，吸收波长红移，颜色加深。 例如 Al3＋ 的显色反应： 茜素 茜素铝 （黄色） 无色 （红色） 如 偶氮胂Ⅲ、PAR 等都是偶氮类显色剂。 （三）提高光度测定灵敏度和选择性的途径 2.4.4 共存离子干扰的消除 共存离子干扰的消除 2.4.5 测定条件的选择 （二）参比溶液的选择 选用形状、大小和光学性质完全相同的比色皿，分别装入参比溶液和待测试液。 （三）吸光度读数范围的选择 （三）吸光度读数范围的选择 * * 2.4 分析方法的建立 第2章 可见－紫外吸光光度法Visible and Ultraviolet Absorption Spectroscopy 显色反应：将待测组分转变为有色化合物的反应。 主要为配位反应、氧化还原反应、缩和反应、重氮化－偶合反应等。 显色剂：能与待测组分形成有色化合物的试剂。 选择显色反应时，应考虑的因素： （一）灵敏度高。 用ε 的大小来衡量显色反应灵敏度的高低。 ε 越大，灵敏度越高。 一般ε 约为 10 3 ～ 10 5。 （二）选择性高。 即共存组分不与显色剂发生明显的干扰反应。 选择性试剂 和 特效试剂。 （三）显色剂无干扰吸收 显色剂在测定波长处无明显吸收。 对比度：两种有色物最大吸收波长之差（△? ）。 要求显色剂和显色物的 △? ≥ 60nm。 （四）显色反应的稳定性 要求与待测组分定量显色，显色物组成恒定、性质稳定。 （一）显色剂用量 显色反应： M ＋ R MR 固定其他条件，改变显色剂用量，显色后，测吸光度，作 A～cR 关系曲线，有如下所示的几种情况。应选择曲线变化平坦处的用量。 （二）反应体系的 pH 值 显色剂： HR H＋ ＋ R－ 显色反应： R－ ＋ M＋ MR 固定其他条件，改变溶液酸度，在相同实验条件下，分别测定不同 pH 值下显色溶液的吸光度。选择曲线中吸光度较大且恒定的平坦区域内所对应的pH值。 （三） 显色时间 t 作显色物的稳定性实验：固定其他条件显色，在不同时间测定显色物的吸光度A，作 A～t 关系曲线。选择曲线中平坦部分所对应的时间作为显色时间。 （四）显色温度 T 在不同温度下作A～t 关系曲线，选显色快、褪色慢、吸收强的曲线所对应的温度。 （五）溶剂 一般采用水相测定，也可适当改变溶剂成分。 （一）无机显色剂： 灵敏度较低，选择性不太高，显色物不太稳定。现还在应用的有：硫氰酸盐、钼酸铵、过氧化氢等几种。 （二）有机显色剂： 种类繁多，常为螯合剂，生成络合物后，颜色发生明显变化；具有性质稳定、显色灵敏度高、选择性好、对比度大等优点，其应用最广泛。 有机显色剂及其显色物的颜色与其分子结构密切相关它们往往含有生色团和助色团。 生色团：是指某些含有π 键的不饱和基团。 比如 C=C ， —C≡C— ， C=O ， —N=N— , － NO2 ， －NO 、 芳基、 对醌基 等都是生色团。 助色团：是含有带孤对电子的杂原子的饱和基团和烷基，它本身不能吸收＞200nm的光，但它们与生色团相连时，能使化合物的λmax向长波方向移动，即产生了红移，同时ε↑。 比如 —OH ， —OR ， —NHR ， —SH ， —X ， －CH3 等都是助色团。 （1）偶氮类显色剂： 分子中都含有偶