分子生物学复习整理.docVIP

-------------------------------------------------------一、二章--------------------------------------------------- 分子生物学的定义、发展简史和研究内容 【分子生物学】：从分子水平研究生物大分子的结构与功能从而阐明生命现象本质的科学，主要指遗传信息的传递（复制）、保持（损伤与修复）、基因的表达（转录与翻译）与调控。 【发展简史】：1865孟德尔“遗传因子”提出，1900年孟德尔遗传定律被证明，1910年Morgan基因存在染色体上，1944Avery证明基因就是DNA分子（肺炎双球菌的转化实验），1957,Heinz和B. Singre 证明RNA也是遗传物质（烟草花叶病毒感染实验） 1953 Watson和Crick提出DNA分子双螺旋结构，1958 Crick提出中心法则，1958 Meselson和Stahl证明DNA半保留复制，1959 Uchoa和Kornberg发现DNA和RNA生物合成机理， 1961 Jacob和Monod提出操纵子学说 1970 RNA逆转录酶，1977 Sanger发明了测定DNA分子内核苷酸序列的方法（双脱氧链终止法），1983 Barbara发现自发转移遗传基因，1989 Altman和Cech发现核酶。 【研究内容】：基因与基因组的结构与功能；DNA的复制、转录与翻译、基因的表达与调控、DNA重组技术、生物大分子的结构与功能研究。 什么是DNA的变性？引起变性的主要因素？什么是DNA复性？复性对浓度的依赖关系是怎样的？ 【DNA的变性】：DNA双螺旋结构遭到破坏解链，原来隐藏在双螺旋内部的发色基团暴露出来，使DNA的物理化学性质发生一系列的变化称为DNA的变性。 【引起变性的因素】加热；极端pH值；有机溶剂、尿素和酰胺 【DNA复性】变性的DNA链在适当条件下重新缔合成双螺旋结构的过程。 【复性对浓度依赖关系】浓度依赖程度直接与DNA序列的复杂性相关，具体表现为越复杂的结构更需要较高的DNA单链浓度才能合成DNA分子双螺旋链，符合二级反应动力学方程。 名词解释： DNA熔解温度、分子杂交 【DNA溶解温度】通常将在加热变性条件下DNA双螺旋结构失去一半时的温度称为DNA的熔点或溶解温度，用Tm表示。 【分子杂交】不同来源的互补序列退火，形成双链的过程称为分子杂交。 --------------------------------------------------------第三章----------------------------------------------------- 怎样通过实验证实DNA复制是半保留复制？ 【证明】：首先让大肠杆菌在以15N作为唯一氮源的培养基连续培养得到被15N标记的原始DNA样本；然后将此样品至14N的普通培养基分别培养20min和40min，最后将以上包括原始样品在内的三个样品进行离心，对比亲代与第一、二代轻重量分布情况如图所示得出DNA是半保留复制的结论。 名词解释：复制子、复制叉、复制起点、复制终点、θ复制、滚环复制、D环复制、岗崎片段、端粒 【复制子】每个DNA复制的独立单元 【复制叉】复制开始时在复制起点形成的一个特殊的叉形结构，是复制有关酶和蛋白质组装成复合物和合成新链的部位。 【复制起点】能够起始一段DNA复制的一段基因序列，富含AT碱基对。 【复制终点】能够终止一段DNA复制的一段基因序列 【θ复制】是一种双向复制的方式，即在复制起始形成两个复制叉或生长点，然后DNA在复制叉处两条链解开，各自合成互补链，最后在电子显微镜下看到形如眼或泡的结构称为θ复制。 【滚环复制】是单向复制的一种特殊方式，其复制叉沿环状模板滚动，每一轮合成的一圈DNA取代亲代一条DNA链，原来的DNA链被滚动出一定长度后也作为模板重新合成一条新链最后在连接酶的作用下成环。 【D环复制】是一种单向复制，其特点是两条链的合成高度不对称，即一条链先复制，另一条链保持单链而被取代，在电镜下看到呈D环形状。待一条链复制到一定程度露出另一条链的复制起点时，才开始复制。 【岗崎片段】在DNA复制过程中，DNA滞后链不连续复制合成时期产生的较短DNA链。 【端粒】线状染色体末端DNA高度重复序列。由端粒DNA和端粒蛋白组成。其生物作用是维持染色体的稳定，保证染色体的完全复制，残余染色体在核内的空间排布。 DNA聚合酶具有怎样的性质？ 【DAN聚合酶性质】?催化DNA链的合成，在DNA聚合酶作用下，3’-羟基的核酸作为引物，dNTP被加到DNA末端，同时释放焦磷酸?5’-3’外切核酸酶活性?3’端水解DNA活性 大肠杆菌中有哪几种DNA复制酶？分别起什么作用？ 【大肠杆