嗜热链球菌抑制法抗生素的测定.pptxVIP

生鲜乳中抗生素残留检验 主讲：刘 伟 2 一、原理 样品经过80℃杀菌后，添加嗜热链球菌菌液。培养一段时间后，嗜热链球菌开始增殖。这个时候加入代谢底物2，3，5-氯化三苯四氮唑（TTC），若该样品中不含有抗生素或抗生素浓度低于检测限，嗜热链球菌讲继续增殖，还原TTC成为红色物质。相反，如果样品中含有高于检测限的抑菌剂，则嗜热链球菌受邀到抑制，因此指示剂TTC不还原，保持原色。 噬热链球菌抑制法 3 二、试剂和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下： 冰箱：2℃~5℃、-20℃~-5℃ 恒温培养箱：36℃±1℃ 带盖恒温水浴锅：36℃±1℃、80℃±2℃ 天平：感量0.1 g、0.001 g 无菌吸管：1 ml（具0.01 ml刻度），10.0 ml（具0.1 ml刻度）或微量移液器及吸头 无菌试管：18 mm×180 mm 温度计：0℃~100℃ 旋涡混匀器 噬热链球菌抑制法 4 三、菌种、培养基和试剂 噬热链球菌抑制法 5 1．菌种：嗜热链球菌 2．灭菌脱脂乳 3．4% 2，3，5-氯化三苯四氮唑（TTC）水溶液：：1 g 2，3，5-氯化三苯四氮唑溶于5 mL灭菌蒸馏水中，装褐色瓶中于2 ℃～5 ℃保存。临用时用灭菌蒸馏水5倍稀释。成为4%的水溶液。 4．青霉素G参照溶液：称取青霉素G钾盐标准品30.0mg，溶于无菌磷酸盐缓冲液中，使其浓度为100 I