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发酵工程复习资料
第一章 绪论
发酵的概念
传统概念:在厌氧的条件下,糖在酵母菌等微生物细胞的作用下进行分解代谢,向菌体提供能量,从而得到产物酒精和CO2的过程。
现代概念:利用微生物在有氧或无氧条件下的生命活动来制备微生物菌体或其代谢产物的过程。
发酵工程的概念
利用微生物特定性状和功能,通过现代化工程技术生产有用物质或直接应用于工业化生产的技术体系,是将传统发酵与现代的DNA重组、细胞融合、分子修饰和改造等新技术结合并发展起来的发酵技术。包括发酵(微生物反应过程)和提取(后处理/下游加工过程)。
发酵工程与化学工程相比的优点和问题
优点:1.反应条件温和。
2.原料来源广泛,成本低廉。
3.反应以生命体的自动调节方式进行。
(1)多个反应可以在单一容器同时进行。
(2)高度选择性地进行复杂化合物特定部位的氧化、还原、官能团导入等反应。
4.发酵产品类型多样。
5.生产发酵产物的微生物菌体本身也是发酵产物,发酵液一般对生物体无害。
6.通过微生物菌种的改良,能够利用原有设备较大幅度的提高生产水平。
问题:1.底物转化率低,副产物造成提取和精制困难。
2.产物受环境因素和细胞内因素的共同影响,菌体易发生变异。
3.原料是农副产品,价格质量波动较大。
4.生产前准备工作量大,花费高,相对化学反应而言,反应效率低。
5.通常底物浓度不能过高,且要在无杂菌污染情况下进行。
6.发酵废水常有较高的BOD和COD,需处理后排放。
基因工程技术应用的优势和局限
优势:
1.可以按照自己的意志,改良或创建微生物新种,从而生产各种特定的微生物产品。
2.可以显著提高现有微生物产品的产量。
局限:
1.重组菌存在不稳定性,导入的嵌有外源基因的质粒容易从宿主细胞内脱落而使外源基因不表达。
2.表达的目标产物有时会包含在细胞中,这些都是造成目标产物浓度低的也原因。
发酵工程的发展的重要特点
1.少量培养?大规模培养
2.浅层培养?厚层(固体)/深层(液体)培养
3.固体培养技术?液体培养技术
4.静止式液体培养?通气搅拌式液体培养
5.单批培养?连续培养
6.分散微生物细胞?固定化的细胞基团
7.单纯微生物细胞?利用高等动植物细胞
8.单菌发酵?混菌发酵
9.野生菌种?变异株或“工程菌”
发酵工程菌种的特点
能在条件廉价原料制成的培养基上迅速成长,得到高产的代谢产物。
可以在易于控制的培养条件下迅速生长和发酵,酶活高。
生长速度和反应速度快,发酵周期短。
根据代谢控制的要求,选择单产高的营养缺陷型突变菌株或调节突变菌株或野生菌株。
选育抗噬菌体能力强的菌株,使其不易感染噬菌体。
菌种纯粹,不易变异退化,以保证发酵生产和产品质量的稳定性。
菌钟不是病原菌,不产生任何有害的生物活性物质和毒素。
发酵工程菌体的优化的定义,目的和研究内容
定义:发酵过程的优化是指最佳控制发酵过程的方案或发酵过程中主要控制的项目和方法。
目的:发酵过程优化的目的是使细胞生理调节、细胞环境、反应器特性、工艺操作条件与反应器之间这种复杂的相互关系尽可能地简化,并对这些条件和相互关系进行优化,使之最适于特定发酵过程的进行。
研究内容:
微生物细胞生长过程
营养物质的摄取、代谢转化、不同环境条件下微生物代谢的分布
微生物反应的化学计算
运用代谢通量分析方法,提出微生物代谢途径的可能改善方向
生物反应动力学
研究生物反应速率及其影响因素,建立动力学模型,缺定发酵过程的最佳生产条件。
生物反应器工程
包括生物反应过程的参数检测与控制
发酵工程逐级放大的内容和目标
小试:
采用实验室小型设备,包括三角锥形瓶、1-50L发酵罐、实验室其他常规设备等进行的试验
目标:初步评估出所发酵产物是否具有效益和生产的可能性
中试(中型试验)
采用试验工厂或发酵车间的小规模设备。如50-5000L发酵罐,与其相适应的分离、过滤、提取、精制等设备,根据小试阶段获得的最佳发酵条件进行放大试验
目标:基本确定发酵产物能否进行工业大规模生产,初步确定生产该产品的必要性和可行性。
大试
用工业大规模设备5000L以上的发酵罐,包括大型发酵罐,分离,过滤,提取,纯化等大型设备,根据中试阶段获得的最佳发酵条件的参数进行试验性生产。
目标:确定发酵产物能否进行工业性大规模生产,生产该产品的必要性和可行性。
第二章 微生物菌种的选育
选育的原理,类型,和主要内容
原理:利用微生物的遗传变异特性,采用各种手段,改变菌种的遗传性状
类型:
自然选育:通过菌种自然变异的特点
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