实验1总酚类黄酮联合测定2010.ppt

植物体内总酚、类黄酮含量的联合测定 黄酮类化合物--基本母核为2-苯基色原酮 4、标准曲线的绘制 吸取100mg/LD单宁酸标准贮备液0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml分别放入8只100ml容量瓶中，加水至75ml，再加5ml的Folin-酚试剂和10ml20% Na2CO3,混合后定容。即得到系列标准液。放置30min后用760nm波长比色测定。以单宁浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标绘制标准曲线。 附 722型可见光分光光度计使用 1.开机预热3-5分钟。 2.闭盖，黑体，调100% 3.闭盖，用空白代替黑体，调0 次生代谢 vs 初生代谢 次生代谢是指生物合成生命非必需物质并储存次生代谢产物的过程。  初生代谢是指所有生物的共同的代谢途径。合成糖类，氨基酸类,普通的脂肪酸类，核酸类以及由它们形成的聚合物(多糖类、蛋白质类、RNA、 DNA等等)。这些对生物生存和健康必需的化合物就叫初生代谢产物。 它们都是通过生物的代谢作用产生化学物质的过程。 植物酚类化合物的分类 植物酚类化合物是植物次生代谢物的主要类型之一, 在植物界已知有8 000种以上, 主要由类黄酮、酚酸和单宁等三类物质构成, 各类又由许多亚类物质组成(图1) 。研究发现酚类化合物有两类基本结构, 一类是C6??C3??C6环状结构, 包括类黄酮、部分酚酸和缩聚单宁, 另一类是C6??C1型结构, 主要是部分酚酸和水解单宁。在植物中, 这些物质并不是以简单形式存在, 它们往往与其他物质结合, 例如: 原花青素常与木质素类结合成聚合物; 黄酮苷元往往与不同的糖结合以糖苷形式存在于植物体中; 酚酸也以酯合或糖苷化形式与植物体内的酯、糖或纤维素结合。 类黄酮是目前种类最多的酚类化合物, 既与植物的花色形成密切相关, 又在植物-环境互作中起重要作用(如防止UV 损伤、抗病、影响豆科植物的根瘤形成等)。自然界中最常见的类黄酮是花青素、黄酮和黄酮醇, 其他包括双氢黄酮(醇)、异黄酮、双黄酮、黄烷醇、查尔酮、橙酮及新黄酮类等。花青素是植物界中最大的一类水溶性色素, 已知天然存在的花青素有20种, 常见的有6种, 花色苷有250多种, 存在于27个科, 73个属的植物中, 约占植物界类黄酮的15% ~20%, 其基本结构都是2- 苯基苯并吡喃形成的花色苷元, 在花色苷元上各个碳位由于取代基的不同而形成各种各样的花色素, 通常在花色基元A 环和C环的C3, C5, C7 上的氢原子被羟基取代, B 环的C3 和C5 上的氢原子被羟基或甲氧基取代而形成6 种基本花青素, 即: 天竺葵色素( pelargonidin)、矢车菊色素( cyanidin)、翠雀花色素( de lph in id in)、芍药花色素( peonidin)、一甲翠雀花色素( petunidin)、二甲翠雀花色素, 其中前3种是最基本的花青素, 分别由堪非醇( kaemp ferol)、栎精( quercetin)和杨梅酮( myricet in)为底物合成, 而芍药花色素由天竺葵色素衍生而来, 一甲翠雀花色素、二甲翠雀花色素由翠雀花色素甲基化而得。 酚酸中羟基苯甲酸型有4 种在植物中普遍存在, 包括对羟基苯甲酸、香草酸、丁香酸和原儿茶酸, 它们通常与糖或有机酸结合形成可溶的共轭物, 或者与细胞壁结合形成木质素, 另外还有一种常见的邻羟基苯甲酸即水杨酸, 在植物中也普遍存在; 羟基肉桂酸型的酚酸也有香豆酸、咖啡酸、阿魏酸和芥子酸等4种广泛存在于植物的果实中, 容易形成酯合的结构。 酚类化合物在植物中的生理功能 酚类化合物在植物中有许多重要的生理功能, 对植物的品质、产量等起着至关重要的作用,主要包括: ( 1) 作为植物叶、茎、表皮、花、果实等器官的着色剂, 主要是花青素和黄酮醇等类黄酮物质, 同时也参与了许多生物间的相互作用。其中花青素普遍存在于植物各个器官中, 显现蓝色、紫色、红色、中间色彩和黑色, 而黄酮醇主要存在于花、叶和果实中表现为浅黄色, 一定程度上可引诱鸟和昆虫, 有助于植物种子传播和花朵授粉; ( 2) 酚类化合物对诸如伤害、侵染、光过剩或UV 辐射等逆境胁迫有防御作用 , 尤其花青素可在一定程度上释放出H+ 猝灭诸如强光、水分胁迫等逆境条件下产生的氧自由基, 避免光抑止、光氧化、脂质过氧化, 保护光合器及细胞膜系统的完整性, 从而起到保护植物的作用; ( 3)作为细胞壁的结构成分, 类黄酮和酚酸参与细胞壁的组成, 起到支撑植物的作用; ( 4)酚类化合物是植物化感作用的生化分子, 目前在植物中发现的大部分化