第十三章 基因工程.pptVIP

第十三章 病毒基因工程 第一节 病毒载体 第二节 基因工程病毒疫苗 第三节 病毒与基因治疗 第四节 病毒与生物防治 第一节 病毒载体 病毒载体作为基因转移和表达载体的特点： (1) 具有能够被宿主细胞识别的有效启动子； (2)在感染周期中能持续复制； (3)有些病毒具有控制复制的顺式和反式作用因 子，能在胞内使外源基因长期高拷贝复制； (4)能高效整合到宿主基因组，可提高外源基因整 合到宿主细胞染色体的效率； (5)病毒衣壳蛋白能够识别细胞接受器，可将外源 基因高效导入寄主细胞。 一、动物病毒载体 1、SV40载体 SV40病毒基因组是环状双链DNA，大小仅为5243bp，与质粒大小相似，适于基因操作。 SV40在感染敏感宿主细胞后，其基因组DNA进入细胞核，首先启动早期基因转录，在细胞质中表达出早期基因t抗原和T抗原，当这2种蛋白质积累到一定程度时DNA开始复制，同时开始驱动病毒晚期基因转录，翻译产生VP1、VP2和VP3等病毒衣壳蛋白，并开始进行病毒粒子的装配。当病毒粒子数量积累到一定量时，细胞裂解释放出子代病毒粒子。 ● SV40病毒不能携带大于本身基因组的DNA分子，因此，外源基因只能通过取代病毒本身的DNA片段进行克隆。 ● 以SV40病毒为基础的克隆载体主要有2种不同类型：