微流控芯片技术用于精子与上皮细胞分离的研究-中国细胞生物学学报.pdf

中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2013, 35(10): 1498–1503 DOI: 10.11844/cjcb.2013.10.0088 技术与方法 微流控芯片技术用于精子与上皮细胞分离的研究 1,2＃ 3＃ 4 1 5 4 1 1* 欧 元 刘蔚然 董军磊 李彩霞 靳现霆 刘 琳 赵兴春 叶 健 1 2 3 ( 公安部物证鉴定中心, 北京 100038; 北京理工大学生命学院, 北京 100081; 清华大学生物医学工程系, 北京 100084; 4 中国人民公安大学刑事科学技术学院, 北京 100038; 5太原铁路公安局临汾公安处, 临汾 041000) 摘要 为研究建立使用微流控芯片技术分离精子与阴道上皮细胞的方法, 选用制作工艺简单的 玻璃-PDMS芯片, 对混合样本进行分离。加样前分别在进、出口池中加入7 μL和10 μL缓冲液, 然后在 进样口加入2 μL混合样本。至少静置8 min后, 从出口池中取出3 μL形成重力驱动的微流体后开始分离, 每隔5 min在进样口补加1 μL缓冲液。达到理想分离效果时, 用移液器从出口池取出分离出的精子, 核 酸酶去除游离DNA, 经过提取、扩增和电泳分离/检测等步骤得到精子的分型结果。结果显示, 使用基 于重力驱动微流体原理的微流控芯片可在30 min 内分离出精子, 不会有上皮细胞进入分离通道; 通过 核酸酶对分离出的精子液的去游离DNA处理, 可得到单一、完整的精子分型。与传统的差异裂解法 相比, 这种方法在很大程度上节省了检验时间, 在性侵案件中具有一定的法医物证分析价值。 关键词 微流控芯片; 精子; 上皮细胞; 段串联重复序列; 分离 Study on Separation of Sperm and Epithelial Cells in a Microfluidic Chip 1,2# 3# 4 1 5 4 1 1* Ou Yuan , Liu Weiran , Dong Junlei , Li Caixia , Jin Xianting , Liu Lin , Zhao Xingchun ,Ye Jian 1 2 ( Institute of Forensic Science, Ministry of Public Security, Beijing 100038, China ; School of Life Science,Beijing Institute of 3 Technology, Beijing 100081, China; Department of Biomedical Engineering,Tsinghua University, Beijing 100084, China ; 4School of Criminal Science and Technology,Chinese People’s Public Security University, Beijing 100038, China; 5Linfen Public Security Department of Taiyu