应用光镜和电镜对病虾组织病理变化的观察与分析.PDFVIP

维普资讯 ~：f-fffJ}7o ，) 第12卷第4期 中 国 病 毒 学 ． 12、N0． 4 1997年 12月 VIR咖 CA SN【 C【A Dec． 1997 应用光镜和电镜对病虾组织细胞病理变化的观察与分析 黄灿华 玮 石正丽 (中国科学院武汉病毒研究所，武汉430071) 2， 撮 要 应用光镜和电子显馓镜技术诧鞍研究正常与发病的中国对虾 7种组织细胞病理变化，结 果显示．病毒侵染后，对虾组织病理变化主要集中在消化系统的肝胰腺 、中腑、胃等组织。在光镜 下，可见消化遭内壁上皮组织广泛受损，细瞻大量坏死或空泡化；电镜下可见主要的维瞻器如线粒 体峙大量断裂、粗面内质阿严重扩张、溶酶体增生．病变绑胞内出理大量变性的膜性结构等。观察 后期，国内学者便开始了养殖对虾病毒病原的研究工作 【Il，现 已弄清 1993～1994年对虾暴发 性流行病发生的主要病原因子是病毒t2-4l。国内外不步报道描述了病毒侵染后对虾出现 甲 壳白斑，肝胰腺白浊、肿大，体色发红等典型流行病学症状，但这些引起的病症往往还与养殖对 虾复杂的环境因素相关。要弄清对虾病毒引起的病症及其致病机理，仍需从对虾内部组织、细 胞的病理变化上加以分析。作者对患病毒性疾病的中国对虾组织细胞病理变化进行了大量的 观察与研究．现将有关结果报道如下： 材料与方法 1 材料 正常虾采自辽宁大连柑海人工养殖的中国对虾．经当地对虾养殖人员确认为是无病虾后．带 回实验室人 工饲养 4～5d，用作对照及作人工感染试验之用。病虾部分采 自河北乐亭人工养殖场 自然发病的中国对虾． 另一部分是人工感染对虾无包涵体杆状病毒后典型发病的中国对虾。 2 方法 2．1 光镜组织切片的制备 取典型病虾与正常虾的鳃、胃、中肠、肝胰腺 、腹部肌肉、生殖腺、心脏等 7种组 织，分别用鲍旺氏(13odn’$)固定灌固定+猹常规方法切制成5～6-n厚的石瞎切片。经苏束精一伊虹(H＆E) 染色，在光镜下观察并拍照。 ， 2．2 电镜超薄切片的制备 取典型病虾与健康虾上述相应的7种组缎迅速切戚为 1m 的小块．立即投入 25％戊二醛一3％多聚甲醛溶液中璜固定．1～2h后取出用 pH7．0+0．1TnoI，L的PBs净洗组坝，然后用 1％ 的 维普资讯 第4期 黄灿华等：应用光镜和电镜对病虾组织细胞病理变化的观察与分析 365 型超薄切片机上切制。常规醋酸铀、枸橼酸铅双染色．样品在 日立H一7000FA型透射电镜下观察，并摄相与 分折。 一 ’ 一 结 果 ． 。 利用光镜与电铙对比观寨典塑病虾与正常虾的7种组织，结果显示病理变化主妻集中在