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三种美白剂对酪氨酸酶活性的抑制陆 三种美白剂对酪氨酸酶活性的抑制 陆 晔 周名权 翁康生 刘国星 (上海市疾病预防控制中心分子生物与基因实验室 200336) Inhibition of Tyrosinase Activity by Three White - ma king Ingredients L u Ye Zhou Mingquan Weng Kangsheng L iu Guoxing ( Molecular Biology and Genet ic La boratory , Shangha i Mun ic ipal Center f or D isea se Prevent ion and Control Shangha i 200336 , China) Abstract Tyrosinase is t he key enzyme in t he p roductio n p rocedure of melain. The quantit y of melain can be co nt rolled by rest ricting t he activit y of t yrosinase. The effect s of t hree co mmo n white - making ingredient s , which are Hydroquino ne , Arbutin ext ract and Kojic acid , o n tyrposinase were detected wit h L - Tyrosine as subst rate in vit ro . The result s showed t hat all of t hese ingre2 dient s had inhibitio n effect in different degree respectively. The mechanism of t heir white - making effect was discussed briefly. Key words :White - making ingredient s Tyrosinase 摘要 酪氨酸酶为黑色素生成的关键酶 ,抑制其活力即可抑制黑色素的生成 。用 L - 酪氨酸酶作底物 ,体外测定了三种常 用美白剂 (对苯二酚 、熊果苷 、曲酸) 对酪氨酸酶活性的影响 。发现这些美白剂均能不同程度地抑制酪氨酸酶活性 ,并初 步探讨了其增白作用的机制 。 关键词 :美白剂 酪氨酸酶 决定皮肤色调的因素主要是皮肤内的黑色 素 ,肤色的深浅主要是决定于黑色素细胞的量及 细胞合成黑色素的能力 。传统的皮肤生理学认 为 :黑色素细胞内含有的酪氨酸 ,在酪氨酸酶的作 用下 ,逐渐氧化成多巴 ,多巴醌 ,中间代谢产物多 巴醌再经过一系列的代谢过程 ,重新排列并聚合 , 最后与蛋白质结合为黑色素蛋白1 。根据 以 上 原理 ,在美白化妆品中添加能抑制酪氨酸酶活性 的美白剂 ,通过抑制酪氨酸酶活性直接抑制黑色 素的形成 ,从而达到美白皮肤的目的 。本文研究 了三种常用美白剂 (对苯二酚 、曲酸 、熊果苷) 对酪 氨酸酶活性的抑制作用 ,并初步探讨了其美白作 用的机制 。 1 实验材料 L - 酪 氨 酸 购 自 美 国 Sigma 公 司 。对 苯 二 酚 、曲酸 、熊果苷由本中心环境卫生科吴尉平医生 提供 。Superdex 75 HR10/ 30 预装柱为 Phar macia 公司产品 。垂直电泳仪为 Hofer 公司产品 。紫外 分光光度计为 Phar macia 公司产品 。 2 实验材料 2 . 1 酪氨酸酶的提取 参照文献 2 的方法加以改进 。取 60g 土豆 , 加 125 ml 磷酸钠缓冲液 ( PB S) p H8 . 0 ,搅拌机中搅 碎 ,5000g ,离心 15 min 。取上清 ,加入饱和硫酸铵 至 55 % 饱 和 度 , 室 温 沉 淀 30 min , 5000g , 离 心 30 min 。取沉淀 , 溶于适量 dd H2 O 中 , 0 . 02 mol/ L PB S 透析过夜 , 得到土豆提取物粗制品 。取 1 ml 粗制品 ,上 Superdex 75 HR10/ 30 预装柱 ,以0 . 02 mol/ ml PB S 洗脱 。收集第一洗脱峰 ,得到土豆中 的酪氨酸酶 。用 4 % ～ 20 %梯度 PA GE 检测其 收稿日期 :2001 - 06 - 11 — 15 — 综述与专论 第五期三种美白剂对酪氨酸酶活性的抑制总第六十八期纯度 , Folin - 酚试剂法测定酶浓度 。品