国际食品法典.PDF

国际食品法典 检测、鉴定和量化食品中特定基因序列和蛋白质* 的执行标准和方法确认准则 CAC/GL 74-2010 * 应用于来自现代生物技术、食品认证、食品生产和其他目的的食品。 CAC/GL 74-2010 1 1 引言 分子和免疫学分析方法是目前公认的测定食品中基因和蛋白质分析物的检测工具。然而,为了不同实验室通过这种 方法获得的结果能被广泛接受和认可，这就需要分析方法满足特定的质量准则。 本指南提供适当的标准来验证用来测定食品中特定基因序列或特定蛋白质分析方法的可靠性。 本指南的第一部分给出了关于验证特定基因序列或特定蛋白质分析方法的一般原则。附件提供的内容包括定量聚 合酶链式反应（PCR）方法的验证，定性PCR 方法的验证和基于蛋白质方法的验证。 1.1 目的和目标 本准则的目标是为分子和免疫学检测方法的建立提供支持，食品中特定基因序列和特定蛋白质定量的验证，确保 不同实验室的结果具有类似的再现性。 本指南的目的是为通过定义适当的检验标准如何建立方法来检测和验证食品中特定基因序列和蛋白质提供指导， 一个方法是否遵守这些标准是以该方法的性能特点为基础的。 本指南详细说明相关标准，并解释如何理解这些标准，即： -通过提供标准的基本原理 -通过展示怎样找出一个方法是否满足给定的标准要求。 1.2 适用范围 本指南提供的食品分析方法的验证标准信息涉及可能出现在食品中的特定基因序列和特定蛋白质的检测、鉴定和 定量，其中包括这些食品所含的来自现代生物技术的原料。这些分子和免疫学方法应用范围很广，例如用于测定 食品中的生物标志物,其中包括这些来源于现代生物技术和食品认证技术，以及用于实验室进行食品分析。 2 方法验证 食品法典委员会（CAC ）强调任何一个被接受的分析方法必须进行国际合作试验，同时遵守根据ISO 5725:1994 或 AOAC/IUPAC 的国际协定。因此，这就可能需要在没有合作试验数据时采取单一实验室确证的临时措施。然而， 用于基因序列和蛋白质的分析方法必须能够适用于多个实验室。 2.1 标准方法 本准则适用于标准方法。 2.2 通用方法标准 分析方法选择的一般原则被应用到法典程序手册。这些原则都适用于本指南。附加条件见附件。 2.3 验证程序 方法验证是确立分析方法的性能特征和局限性的过程。验证结果描述了被分析物可以在何种基质中可以检测。在 相应的检测条件下，验证结果可以呈现分析方法的精密度和准确度。 方法验证是一个漫长的过程，它包括以下主要步骤：  方法预验证。预验证应根据需要逐个进行。预验证应确保效度研究的可行性，也就是说，它应该提供有 关方法的预期目的的适用性的证据。 预验证需通过2-4 个实验室同时进行。应根据验证过程进行统计分析 （例如，“重复性”和“重现性” ）。  方法确认。通过合作试验验证的方法费用较高，通常在单一实验室通过方法可行性的预验证试验后开展。 3 确定基因序列和蛋白质的检测、鉴定、定量方法的特定条件 3.1 方法开发到正式确认 常见的DNA 分析方法是基于PCR 检测特定的基因序列。对于蛋白质检测的常见方法为利用酶联免疫（ELISA ） 和侧向流动装置。对于基因序列的分析，PCR 是目前使用最广泛的方法。当然，其他可以得到相同结果的检测方 法在通过方法验证后用于DNA 序列的检测也是被认可的。 CAC/GL 74-2010 2 3.1.1 方法验收标准（审定要求的条件） 评估相关检测方法前，有必要对该方法和方法测试的信息进行确认，详细说明见附件一。 评价方法的前提条件是核实或者查证使用法典现有的方法能够实现相关的检测。本节描述该方法验收标准必须是 在完成了预验证试验和完整的合作试