第三章基因工程所需的基本条件.ppt

A 用于核酸操作的工具酶 B 用于基因克隆的载体 C 用于基因转移的受体菌或细胞 人造染色体载体 细菌人造染色体(Bacterial Artificial Chromosomes BAC) 细菌人造染色体通常是在大肠杆菌性因子F质粒的基础上 构建的,其装载量范围在50 - 300 kb之间 各种类型的pBACs在大肠杆菌受体菌只能维持单一拷贝 pBACs主要适用于: 克隆大型基因簇(gene cluster)结构 构建动植物基因文库 人造染色体载体 酵母人造染色体(Yeast Artificial Chromosomes YAC) YAC载体应含有下列元件: 酵母染色体的端粒序列 酵母人造染色体的构建: pYAC4 CEN4 EcoRI URA3 TEL BamHI TEL ori Apr TRP1 ARS1 酵母染色体的复制子 酵母染色体的中心粒序列 酵母系统的选择标记 大肠杆菌的复制子 大肠杆菌的选择标记 YAC载体的装载量为350 - 400 kb 人造染色体载体 酵母人造染色体(Yeast Artificial Chromosomes YAC) 酵母人造染色体的使用: pYAC4 CEN EcoRI URA TEL BamHI TEL ori Apr TRP ARS EcoRI EcoRI EcoRI BamHI 连接 转化酵母菌 重组酵母染色体 3

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