第十三部分抗原抗体反应教学讲义.pptVIP

第三节 抗原抗体反应影响因素 影响抗原抗体反应的因素较多，主要有两方面:一方面是受到抗原、抗体的自身因素的影响;另一方面是受到电解质、酸碱度、温度及时间等实验环境因素的影响。 一、应物自身因素 1、抗原 抗原的理化性状、抗原决定簇的数目和种类均可影响血清学反应结果 例如，可溶性抗原与相应抗体反应出现沉淀，而颗粒性抗原与相应抗体反应则出现凝集;单价抗原与抗体结合不出现可见反应;粗糙型细菌在生理盐水中易出现自凝；红细胞与IgG类抗体结合不出现直接凝集等。 抗体是血清学反应中的关键因素，对反应的影响表现在以下三个方面: (1)来源:来自不同动物的免疫血清，其反应性有差异。家兔等大多数动物的免疫血清具有较宽的等价带，通常在抗原过量时才易出现可溶性免疫复合物;马等大动物和人的免疫血清等价带较窄，少量的抗原或抗体过剩，均可形成可溶性免疫复合物;家禽免疫血清不能结合哺乳动物的补体，并且在高盐浓度（80g/L NaCl溶液中沉淀现象明显。单克隆抗体一般不适用于沉淀反应或凝集反应。 2、抗体 (2)特异性与亲和力: 特异性和亲和力是影响血清学反应的两个关键因素，它们共同影响试验结果的准确程度。免疫动物早期获得的抗血清特异性较好，但亲和力低;后期获得的抗血清一般亲和力较高，但长期免疫易使免疫血清中抗体的类型和反应性变得更为复杂。因此，用于诊断的试剂必须尽量选用特异性高、亲和力强的抗体，才能保证和提高试验结果的可靠性。 西南民族大学 第十三章 抗原抗体反应 岳 华 抗原与相应抗体的特异性结合反应称为抗原抗体反应(antigen-antibody reaction)。抗原抗体反应既可在体内作为体液免疫应答的效应机制自然发生，也可在体外作为免疫学实验的结果出现。在体内，可表现为溶菌、杀菌、促进吞噬或中和毒素等作用，有时亦可引起免疫病理损伤，在体外，依相应抗原物理性状 (颗粒状或可溶性)以及反应的条件 (电解质、补体等)不同，可出现凝集、沉淀、细胞溶解和补体结合等反应。 概述 本章叙述的抗原抗体反应，主要是指抗原和抗体在体外结合所表现的反应。由于抗体主要存在于血清中，并且临床上多用血清做试验，所以体外实验中的抗原抗体反应曾称作血清学反应（serological reaction)。但是随着免疫学的发展，血清学的含义已不能概括目前的研究内容，现在多以抗原抗体反应代替血清学反应一词。 一、抗原抗体结合力 抗原和抗体的结合虽然是互补性的特异性结合，但并不形成牢固的共价键，只是通 过非共价键结合，结合方式类似蛋白质和细胞受体或酶与底物之间的结合。抗原与抗体这种弱的结合力涉及下列几种分子间的作用力。 l. 静电引力 抗原和抗体分子带有相反电荷的氨基和羧基基团之间相互的引力，称为静电引力 ，又称库伦引力 。例如，抗体分子上带电荷的碱性氨基酸的游离氨基(--NH3+和酸性氨基酸的游离羧基(—COO--可与抗原分子上带相反电荷的对应基团相互吸引。这种引力的大小与两个相互作用基团间的距离的平方成反比。 2.范德华引力 抗原和抗体相互接近时，由于分子的极化作用而出现的引力，称范德华引力。结合力的大小与两个相互作用基团的极化程度的乘积成正比、与它们之间距离的 7 次方成反比，键能约为4.2---12·5kJ/mol。这种引力的能量小于静电引力。 3.氢键结合力 供氢体上的氢原子与受氢体原子间的引力。在抗原抗体反应中，羧基、氨基和羟基是主要供氢体，而羧基氧、羧基碳和肽键氧等原子是主要受氢体，能的大小取决于方向即氢键具有高度的方向性，因此范德华力更具有特异性。氢键结合力与供氢体和受氢体之间距离的6次方成反比，键能约20·9kJ/mol。 4.疏水作用力 两个疏水基团在水溶液中相互接触时，由于对水分子排斥而趋向聚集的力称为疏水作用力，或称为疏水键。当抗原抗体反应时，抗原决定簇与抗体上的结合点靠近，互相间正、负极性消失，由静电作用形成的亲水层立即失去，从而促进抗原与抗体的相互吸引而结合。疏水作用力在抗原抗体反应中的结合是很重要的。提供的作用力最大，约占总结合力的50%。 二、抗原抗体亲和性 抗原与抗体的结合受多种因素的影响，为了较妥当地表示抗原与抗体结合力的大小，在免疫化学中，一般用亲和性 与亲和力两个术语表示。亲和性是指抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原决定簇之间的相适性而存在着的引力，这是抗原与抗体之间固有的结合力。亲和力是指反应系统中复杂抗原与相应抗体之间的结合能力。 亲和力与亲和性有关，也与抗体的结合价和抗原的有效决定簇数目相关。例如，IgG为两价，其亲和力为单价的l03倍;而IgM为5～10价;其亲和力为单价的107倍。亲和力越大，抗原抗体结合越牢固。而在单克隆抗体反应系统中，