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奈瑟菌属 共同点: 革兰阴性球菌、单个或成双排列、无芽孢、无鞭毛、有菌毛 触酶试验(+) 氧化酶试验(+) 种类:脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等9种 致病菌:脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌 脑膜炎奈瑟菌 是引起流行性脑脊髓膜炎的病原菌 脑膜炎奈瑟菌电镜图 形态染色 革兰阴性、肾形、成双排列 新分离菌株有菌毛和荚膜 在患者脑脊液中位于中性粒细胞内 培养特性--生长条件 营养要求高、在血液、血清培养基中才能生长 专性需氧、初次分离需5%CO2 最适温度35℃,30℃或40℃不生长 可产生自溶酶 常用培养基及生长现象 巧克力色血平板:属营养培养基,菌落无色、光滑湿润、边缘整齐、有光泽,似露水珠,易乳化 卵黄双抗平板(EPV):属选择平板,用于含杂菌的鼻咽拭标本的分离培养,菌落无色、光滑湿润、较大、扁平 生化反应 氧化酶试验阳性 分解葡萄糖、麦芽糖、不分解蔗糖 抗原构造与分型 菌体抗原 无特异性 核蛋白抗原 无特异性,与细菌毒力有关 表面荚膜多糖抗原 具有群特异性 根据此抗原,将该菌分为13个血清群 我国以A群为主,占95%, 抵抗力 抵抗力弱 对寒冷、湿热、干燥、消毒剂、紫外线均敏感 能产生自溶酶 临床意义 传染源:病人、带菌者 传染途径:呼吸道飞沫传染 致病物质:内毒素、荚膜、菌毛 所致疾病:流行性脑脊髓膜炎 临床表现:上呼吸道症状:鼻咽炎等全身感染症状:高热、出血点或瘀血点 脑膜炎症状:头痛、呕吐、颈项强直 特异性预防:接种脑膜炎奈瑟菌荚膜多糖疫苗 微生物检验 标本采集 流脑病人:血液、脑脊液、瘀血点 带菌者检查:鼻咽拭 直接涂片镜检 脑脊液沉淀物、瘀血点涂片革兰染色镜检: 若发现中性粒细胞内、外有革兰阴性双球菌、呈肾形,可作初步诊断 培养检查 增菌培养:血液、脑脊液接种增菌液,5%CO2培养。 分离培养:将增菌培养物转种巧克力色平板,置5%CO2环境,35℃培养18~24小时 可疑菌落:观察菌落特征,取可疑菌落涂片染色镜检,作盐水自凝试验,盐水中无自凝。 鉴定试验 形态染色:革兰阴性、肾形、成双排列 氧化酶(+) 触酶(+) 糖代谢试验:发酵葡萄糖、麦芽糖 生长特性试验:生长温度、营养需求 血清学鉴定与分群:可与相应诊断血清发生凝集 快速鉴定试验 荧光抗体法 荧光素-流脑抗体 +待检物--荧光 (直接法) 流脑抗体 +待检物 +羊抗兔荧光抗体--荧光 (间接法) 间接血凝试验 流脑多糖抗原致敏红细胞 +待检血清 反向血凝试验 流脑抗体致敏红细胞 +标本中可溶性流脑抗原 鉴定依据 形态染色:革兰阴性球菌成双排列 菌落典型:光滑型,易乳化,盐水中无自凝 生化反应: 氧化酶+、触酶- 发酵葡萄糖、麦芽糖 生长条件:普通培养基不生长、 血清学:与相应分群血清凝集 与卡他布兰汉菌鉴别 形态与奈瑟菌相似 18~24℃环境能生长 普通培养基中可以生长 具有DNA酶 淋病奈瑟菌 形态染色 革兰阴性肾形、成双排列 有荚膜、菌毛 淋球菌多侵犯尿道粘膜,急性期常位于中性粒细胞内,急性期多位于中性粒细胞内,慢性期则多在细胞外 根据菌毛分型:T1~T5 T1、T2有菌毛 T3、T4、T5无菌毛 淋球菌革兰染色图 生长条件 营养要求高 专性需氧 5~10%CO2 <30℃或>36.5 ℃不生长 常用培养基和菌落特征 巧克力色培养基 TM培养基(含万古霉素、多粘菌素、制霉菌素) MTM培养基(改良的TM) 菌落特征:圆形、光滑、湿润、灰白色、易乳化 生化反应 氧化酶、触酶:+ 葡萄糖、麦芽糖、蔗糖:+-- 30%H2O2试验:+ 抵抗力 抵抗力极弱 对温度变化敏感 对干燥敏感 对消毒剂敏感 易形成耐药性 临床意义 致病物质:菌毛、IgA蛋白酶 所致疾病: 性接触--引起淋病 产道感染--引起新生儿淋病性眼结膜炎 标本采集 正确取材 女性病人标本:取宫颈内膜分泌物 男性病人标本:取尿道口脓性分泌物 直接涂片 分泌物涂片,做革兰染色 急性炎症期中性粒细胞内可见革兰阴性双球菌。 阳性率男性90%、女性50%~60%。 无症状淋病或轻症患者,尤其是女性,检出率低,只做涂片可漏诊40%以上, 培养检查 取材部位准确 培养基预温 立即接种 最好床边接种 合适的培养基 CO2培养 取氧化酶阳性菌落做下一步鉴定 鉴定试验 氧化酶试验 糖分解试验(葡萄糖、麦芽糖、蔗糖) 30%过氧化氢试验 药敏试验 鉴定依据 形态染色典型:革兰阴性球菌 培养特性:光滑、湿润、易乳化菌落 生化反应:氧化酶阳性、仅分解葡萄糖
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