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核 移 植 技 术 及 应 用 报告人 ：孙 志 杰 导 师 ：马小军研究员 * * * Seminar Ⅰ 精卵结合 胚 胎 细 胞 个 体 显微操作仪 目 录 一 核移植技术简介 二 核移植的分类 核移植的应用 四 展 望 1.1 定义 ：将供体细胞核移入 去核的卵母细胞中,使后者不经 精子穿透等有性过程即可被激 活、分裂并发育,使得核供体的 基因得到完全复制。 一 核 移 植 技 术 简 介 1 切开卵母细胞透明带 2 挤出卵母细胞细胞核 3 注入供体细胞核 4 电融合仪融合 培养 1 2 3 4 5 供体细胞核的来源 体细胞核移植 胚胎细胞核移植 胚胎干细胞核移植 供受体种间关系 异种核移植 同种核移植 核移植目的 生殖性克隆 治疗性克隆 二 核 移 植 分 类 2.1 生殖性克隆 2.2 克 隆 动 物 的 鉴 定 DNA 指 纹 ：指每个个体所特有的基因多态性 鉴定方法：RAPD 微卫星 RFLP DOLLY的鉴定：微卫星 绵 羊 1997 小 鼠 1998 牛 1998 山 羊 2000 张 涌 西北农林科技大学 猪 2000 兔 2001 大 鼠 2003 周 琪 中科院动物所 狗 2005 2.3 已 克 隆 的 动 物 2.4 治 疗 性 克 隆 细胞治疗 组织替代 器官移植 细胞治疗 异种器官移植 生产治疗性蛋白 保护濒危物种 培育各种疾病动物模型 三 核 移 植 技 术 的 应 用 1 细 胞 治 疗 三 核 移 植 技 术 的 应 用 1.1 定义 细胞移植可以治疗由于细胞功能缺陷所引起的各种疾 病，如糖尿病 ; 中枢神经系统疾病（帕金森，阿尔莫茨症）; 肝功能衰 竭 ; 甲状腺疾病。 面临的问题 解决方法 细胞来源 尸源性 异种细胞 免疫排斥 免疫抑制剂 基因敲除 免疫隔离 核移植 消除免疫排斥 胚胎干细胞 提供细胞来源 三 核 移 植 技 术 的 应 用 2005 韩国科学家 黄禹锡应用体细胞核移植，从糖尿病；脊索损伤；先天性低丙球蛋白血症病人的皮肤细胞中克隆出了早期胚胎，并成功提取出新的胚胎干细胞系， 突 破 克隆早期胚胎和提取干细胞的效率从 1/240 提 高到 1/20。 体细胞全部来自于患有各种疾病的病人 遗 传 疾 病 的 治 疗 2 异 种 器 官 移 植 可移植器官短缺 猪的器官大小、结构和功能上与人体器官相近 急性免疫排斥反应 基因敲除半乳糖基转移酶