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第五章 PCR 聚合酶链反应Polymerase Chain Reaction 聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）是一种体外特定核酸序列扩增技术。也称PCR扩增技术 PCR技术由Kary Mullis及其同事于1985年在Cetus(希得）公司发明并命名。PCR可以说是20世纪核酸分子生物学研究领域的最重大发明之一，Mullis因PCR技术分享了1993年诺贝尔化学奖 一．PCR的基本原理 PCR扩增技术的本质是根据生物体DNA的复制原理在体外合成DNA。 PCR扩增技术的基本原理离不开DNA复制的基本规律。类似于DNA的天然复制过程，其基本要素与DNA复制的基本要素一致。其特异性主要依赖于与靶序列（Target Sequence）两端互补的寡核苷酸引物，由变性——退火——延伸三个基本反应步骤构成。 二．PCR的步骤 变性——退火——延伸 三个基本反应步骤构成。 模板DNA的变性：模板DNA经加热至94℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备； ②模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合； ③引物的延伸：DNA