第七章发酵生产的染菌及防治.pptVIP

第七章 发酵生产染菌及防治-p228;;1、染菌对发酵的影响 种子染菌 发酵染菌 (发酵前、中、后） 2、染菌检查判断 镜检 肉汤培养 平板/斜面培养 ;3、染菌原因分析;4、常见染菌类型;;6、污染不同种类和性质的微生物的影响;6.1、噬菌体的污染与防止;;6.2污染其它杂菌 有些杂菌会使生产菌自溶产生大量泡沫，即使添加消泡剂也无法控制逃液，影响发酵过程的通气搅拌。 有的杂菌会使发酵液发臭、发酸，致使pH下降，使不耐酸的产品破坏。特别是染芽孢杆菌，由于芽孢耐热，不易杀死，往往一次染菌后会反复染菌。 ;;一、染菌对不同发酵过程的影响;一、染菌对不同发酵过程的影响（续）： 放线菌由于生长的最适pH为7左右，因此染细菌为多，而霉菌生长pH为5左右，因此染酵母菌为多。 （1）抗生素：青霉素生产中污染产青霉素酶的杂菌（自身产生或诱导产生），在发酵过程中，都会使青霉素迅速分解破坏，使目的产物得率降低，危害十分严重。一般污染细短产气杆菌比粗大杆菌的危害大。 链霉素（污染细短杆菌、假单孢杆菌和产气杆菌比粗大杆菌的危害大）、四环素（污染双球菌、芽孢杆菌和夹膜杆菌的危害较大）、红霉素、卡那霉素等虽不象青霉素发酵染菌那样一无所得，但也会造成不同程度的危害。灰黄霉素、制霉菌素、克念菌素等抗生素抑制霉菌，对细菌几乎没有抑制和杀灭作用。 ; （2）核苷或核苷酸发酵过程：因生产菌多为营养缺陷型微生物，其生长能力差，所需的培养基营养丰富，易受到杂菌的污染，且染菌后，培养基中的营养成分迅速被消耗，严重抑制了生产菌的生长和代谢产物的生成，污染芽孢杆菌的危害最大。 （3）柠檬酸等有机酸发酵过程：一般在产酸后发酵液的pH值比较低，杂菌生长十分困难，在发酵中、后期不太会发生染菌，主要是要预防发酵前期染菌，最怕污染青霉菌。 （4）谷氨酸发酵：周期短，生产菌繁殖快，培养基不太丰富，一般较少污染杂菌，但噬菌体污染对谷氨酸发酵的影响较大。 （5）疫苗：多采用深层培养，是不经提纯直接使用的产品，在其培养过程中，一旦污染杂菌，不论死菌、活菌或内外毒素，都应全部废弃。 ;三、染菌发生的不同时间对发酵的影响;3.2、发酵前期染菌;3.3、发酵中期染菌 ;3.4、发酵后期染菌;四、不同染菌途径对发酵的影响 种子带菌：种子带菌可使发酵染菌具有延续性 空气带菌：空气带菌也使发酵染菌具有延续性，导致染菌范围扩大至所有发酵罐 培养基或设备灭菌不彻底：一般为孤立事件，不具有延续性 设备渗漏：这种途径造成染菌的危害性较大 ;五、染菌对产物提取和产品质量的影响 （1）对过滤的影响 发酵液的粘度加大（菌体自溶、发酵不彻底）。 造成过滤时间拉长，影响设备的周转使用，破坏生产平衡；大幅度降低过滤收率。 （2）对提取的影响 溶媒萃取：易发生乳化 离子交换：预处理分离不彻底的胶体物质（水溶性蛋白质等）易粘附在离子交换树脂表面或被离子交换树脂吸附，大大降低离子交换树脂的交换量，洗脱时易混入产品中。;（3）对产品质量的影响 因含有较多分离不彻底的蛋白质等物质，对产品的纯度有较大影响，同时会使产品放置一段时间后增大出现混浊的可能，影响产品的外观。 六、染菌对三废处理的影响 使过滤后的废菌体无法利用，发酵染菌的废液，生物需氧量（BOD）增高，增加三废治理费用和时间。 ;第二节 发酵异常现象及原因分析;谷氨酸发酵时正常和异常的溶氧曲线 ;二、染菌的检查和判断 1、检查的目的、意义 以无菌试验的结果较可靠、迅速的判断染菌，以及时采取处理措施。每个工序或经一定时间都应进行取样检查。 无菌试验的目的： （1）监测培养基、发酵罐及附属设备灭菌是否彻底 （2）监测发酵过程中是否有杂菌从外界侵入，生产过程中是否存在染菌的隐患和死角 2、 生产上常用的检查方法有：①显微镜检查（简便、快速，能及时发现杂菌，但镜捡取样少，观察面也小，则不易捡出早期杂菌）；②平板划线检查；③肉汤培养检查。（ 后两种操作较繁琐（需过夜培养），但能捡出比前者更少的杂菌，结果为主要依据 ）;表8-1 发酵过程的杂菌检查;3、发酵染菌率计算基准 总染菌率指一年发酵染菌的批（次）数与总投料批（次）数之比的百分率。染菌批次数应包括染菌后培养基经重新灭菌，又再次染菌的批次数在内。是我国的统一的习惯计算方法 总染菌率%= 还用设备染菌率（统计发酵罐或其他设备的染菌率）、不同品种发酵的染菌率、不同发