第30、32、33章 核酸和蛋白质的生物合成.pptVIP

第30、32、33章 核酸和蛋白质的生物合成 第一节　DNA的生物合成与修复 第二节　RNA的生物合成和加工 第三节　蛋白质的生物合成 第一节　DNA的生物合成 一、DNA的复制 二、RNA的逆转录 一、DNA的复制 半保留复制 复制子 半不连续复制 DNA复制体系 DNA复制过程 （一）半保留复制 （二） 复制子 复制子:基因组中能单独进行复制的单位。每个起始点到终止点的区域为一个复制子。 单复制子:　一般原核生物DNA 多复制子：真核生物染色体DNA，具有多个复制起点。 　　　　　 起始点(origin of replication, ori, O)（复制原点）: 复制子中控制复制起始的位点，富含AT。 终止点：终止复制的位点。 复制的方向：单向或双向 （5 ′→ 3′） （三） DNA的半不连续复制 冈崎片段 （四）DNA复制体系　 底物： dNTP (dATP, dGTP, dCTP ,dTTP) 模板： 单链的DNA 引物： 寡核苷酸引物（RNA) 酶和蛋白质因子 DNA复制中出现的酶 DNA聚合酶 以4种dNTP为底物 反应需要接受DNA模板的指导,产物DNA的性质与模板相同 反应需有引物 3 ’－OH的核酸链，不能催化游离的dNTP的聚合。 链生长方向　5’→ 3 ’ DNA连接酶（ligase) 解螺旋酶（helicase） DNA旋转酶（拓扑异构酶） 单链结合蛋白 引物合成酶(引发酶，RNA聚合酶，primase) DNA聚合酶 大肠杆菌中含有5种不同的DNA聚合酶 DNA聚合酶Ⅰ DNA聚合酶Ⅱ DNA聚合酶Ⅲ DNA聚合酶Ⅳ DNA聚合酶Ⅴ DNA聚合酶Ⅰ 具有DNA聚合酶活性，可以使DNA链沿5′→3′方向延长， 它还具有3′→ 5′核酸外切酶的活性，由3′端开始水解DNA链； 它具有它还具有5′→3′核酸外切酶的活性，由5′端开始水解DNA链； DNA聚合酶Ⅱ DNA聚合酶Ⅱ是多亚基酶 以dNTP为引物，从5′→ 3′方向合成DNA 带有3 ′→ 5 ′外切酶的活力，但是没有5′→ 3′核酸外切酶的活力 也是一种修复酶，而不是一种复制酶 大肠杆菌三种DNA聚合酶的性质比较 （五） DNA复制过程 1.大肠杆菌 起始阶段 复制的延伸 复制的终止 2 真核生物 （一）错配修复 错配修复对DNA复制忠实性的贡献力达102-103，DNA子链中的错配几乎完全都被修正，充分反映了母链的重要性。 （二）切除修复 糖苷水解酶能特异性识别常见的DNA损伤（如胞嘧啶或腺嘌呤去氨酰化产物）并将受损害碱基切除。去掉碱基后的核苷酸被称为AP位点。 DNA分子中一旦产生了AP位点，AP核酸内切酶就会把受损核苷酸的糖苷-磷酸键切开，并移去包括AP位点核苷酸在内的小片段DNA，由DNA聚合酶Ⅰ合成新的片段，最终由DNA连接酶把两者连成新的被修复的DNA链→碱基切除修复(base-excision repair)。 （四）DNA的直接修复 生物体内还存在多种DNA损伤以后直接修复(direct repair)，不需要切除碱基或核苷酸的机制。 1、在DNA光解酶(Photolyase)的作用下把在光下或经紫外光照射形成的环丁烷胸腺嘧啶二体及6-4光化物(6-4photoproduct)还原成为单体的过程。 2、使06-甲基鸟嘌呤脱甲基化的甲基转移酶，以防止形成G-T配对。 二、RNA的逆转录（RNA?DNA） 以RNA为模板合成DNA的过程叫做逆转录。 逆转录酶(reverse transcriptase, RT)是个多功能酶： 逆转录活性： cDNA:合成出的相应于一定mRNA的互补DNA。 RNase H 活性： DNA聚合酶活性： 常用的逆转录酶有两种： 来自鸟类成髓细胞瘤逆转录病毒称为AMV-RT； 来自鼠白血病毒称为MMLV-RT。 RT的发现对于遗传工程技术起了很大的推动作用，它已成为一种重要的工具酶。用组织细胞提取mRNA，在反转录酶的作用下，合成出cDNA，由此可构建出cDNA文库，从中筛选特异的目的基因，这是在基因工程技术中最常用的获得目的基因的方法。 第二节　 RNA的生物合成和加工 RNA复制 转录 一、RNA的复制 RNA复制酶 以病毒RNA做模板，再由4种核苷三磷酸和镁离子存在的时候合成与模板性质相同的RNA 二、转录 以DNA为模板，按碱基配对原则把DNA的序列信息抄录给RNA，在RNA聚合酶的参与下合成RNA链。 RNA聚合酶 无3′－5’外切酶活性，不需引物；需DNA模板，以NTP（ATP、GTP、CTP、