化学发光法技术概要课件.pptVIP

* 化学发光法技术概要 化学发光法反应基本原理 抗原-抗体反应 抗体能够特异性识别相对应的抗原，并与之结合，这种反应称之为抗原抗体反应。 抗原-抗体反应具有特异性、敏感性、可逆性等特点。 酶促底物发光 将检测试剂中的抗原或抗体用碱性磷酸酶（AP）加以标记，通过发光底物测定相对光子数（RLUs值），来检测目标抗体或抗原的浓度。 化学发光法反应模式 一步法 （15min反应+15min显色） 夹心法 竞争法 两步法 （15min+15min反应+15min显色） 间接法 捕获法 一步法：夹心法 一步法：竞争法 两步法：间接法 两步法：捕获法 化学发光法反应介质 固相介质：磁珠 酶标记物：碱性磷酸酶（AP） 发光底物：AMPPD 磁珠 基本材质：Fe3O4/Fe2O3，褐色磁性物质 直径大小：1μm左右 磁珠类型： 分为氨基磁珠、羧基磁珠、苯甲磺酰基磁珠和链霉亲和素磁珠等四种磁珠 磁珠特性： 不同供应商的不同类型磁珠，亲水性不同，在溶液中的状态也不同，所需的磁吸时间也不同。磁吸时间过短，会造成丢磁；磁吸时间过长，会造成磁珠聚集，不宜分散。 碱性磷酸酶（AP）及发光底物 RLUs值范围 板式发光范围1,000-20,000,000RLUs 管式发光范围0-10,000,000RLUs 分辨率要求