遗传学-转座培训讲学.ppt

疑 惑 ！;主要内容;一、转座因子的发现;;Transposition(转座) ：由可移位因子介导的遗传 物质重排现象。;最简单的转座子，不含有任何宿主基因。 是独立的单元，每个IS元件只编码转座酶。 是细菌染色体或质粒DNA的正常组成部分。;Transposase gene;在插入位点,IS 两侧总有短的正向重复(Direct repeat);IS序列结构特征比较;一类较大的转座子，除转座酶基因外，带有某些抗药性基因（或其他宿主基因）的转座子 复合转座子(composite transposon)：带有IS的Tn 简单转座子(simple transposon)：不含IS的Tn;??类带有某些抗药性基因（或其他宿主基因）的转座子;;; 两个相邻的IS可以使他们中间的DNA移动，同时也可制造出新的转座子 ;它是Ecoli的一种温和噬菌体。与必须整合到宿主染色体特定位置上的一般温和噬菌体不同，Mu噬菌体并没有一定的整合位置。 与其他温和性噬菌体的差别：其基因组不论在进入裂解周期或处于溶源状态都可随机整合到宿主染色体的任何位置，且游离的和已整合的基因次序是相同的. 与IS和Tn两种转座因子相比，Mu噬菌体的分子量最大（38kb），它含有20多个基因。Mu噬菌体引起的转座可以引起插入突变，其中约有2％是营养缺陷型突变。;1）结构:线形DNA分子，38kb.不含IR 序列，游离MuDNA两端各带一段寄主DNA , 整合状态时会消失。 2）MuDNA左端含有与转座有关的A基因和B基因，分别编码分子量为70kb和33 kb的两种蛋白。 C基因编码的产物对A基因和B基因表达有负调节作用 右端含有G片段。;四、转座机制;Replicative transposition(复制性转座);Replicative transposition(复制性转座);复制性转座要经过一个共整合阶段;共整合体的形成;;Non-replicative transposition(非复制性转座);非复制性转座要经过链的断裂与重连;另一种方式;玉米的Ac-Ds系统;;产生转座酶;Autonomous Nonautonomous;果蝇的转座子;P因子的结构与功能示意图;;六.逆转录病毒和反座子 Retroviruses and retroposons;RNA intermediate transposition;逆转录病毒整合入宿主DNA中的分子机制，其本质是转座;逆转录病毒和反座子的循环;6.1逆转录病毒（Retroviruses）;逆转录病毒颗粒结构;RNA; 调节和 启动转录;Reverse transcription Integration Transcription Packaging;;LTR(long-terminal repeat):长末端重复序列;3 forms;Reverse transcription;David Baltimore;正链病毒 (Plus strand virus);负链DNA的合成;正链DNA的合成;From RNA to ssDNA, from ssDNA to dsDNA;Enzymes involved;Integration;Integration or circulation;整合(integration);Integrase;Transcription;Transcription;Enzymes involved;Two fates of RNA:;Translation;Everything is ready!;Packaging;HIV 从受感染细胞的质膜出芽的情形;6.1.3 逆转录病毒会将宿主序列在细胞间转送;;6.2 Three classes of retroposons;;能编码逆转录酶和/或整合酶，因此能进行转座 有末端重复序列 但没有env基因，不能形成病毒颗粒，不能独立地感染其它细胞，;6.2.1 酵母Ty (Yeast Ty elements );;;;Ty elements generate virus-like particles;6.2.2 果蝇(D. melanogaster)中的copia反座子;copia读码框: 4227 bp，与逆转录病毒的 gag和pol读码框同源; 不含env 同源序列。;LINES(long interspersed elements) Transcripted by RNA Pol II Copy #: 20~50k per mammalian cell Structure: ~6500bp, not terminate at L