荔枝果皮过氧化物酶的纯化及部分酶学性质研究-热带亚热带植物学报.pdf

热带亚热带植物学报 2004，12(5)：449—454 Jouma／ofTropicalandSubtropcialBotany 荔枝果皮过氧化物酶的纯化及部分酶学性质研究 庞学群 ，段学武2，张昭其 ，徐凤彩 ，季作梁2 (1．华南农业大学生命科学学院，广东广州510642；2．华南农业大学园艺学院，广东 广州510462) 摘要 ：经硫酸铵分级盐析、DEAE-Sepharose和 SephadexG-75柱层析分离，从荔枝果皮中分离提纯了过氧化物酶 (POD)，该酶被纯化了12．5倍，产率为 1．9％。经 SDS确定为单一条带。该酶最适反应温度为35~C，对热具有较 强的稳定性，经 75℃处理30min，酶活性只损失50％。最适pH约为6．5，但在pH4．0—8．0范围内活力仍比较稳定。该 酶在 25~(2和0．05mol／L磷酸缓冲液 (pH7．0)条件下对愈创木酚 、邻苯二酚和没食子酸的Km分别是2．75、12．4和 12．8mmol／L。二硫苏糖醇和抗坏血酸能完全抑制POD活性，L半胱氨酸、柠檬酸、FeSO4、GSH、SDS和ZnSO4对POD 活性有一定的抑制作用，而FeC1和CuSO 对POD则有较好的激活作用。 关键词：