甲胎蛋白（AFP）测定.doc

甲胎蛋白（AFP）测定 原理 Architect i2000SR AFP是采用化学发光微粒子免疫分析（Chemiluminesent Microparticle ImmunoAssay, CMIA）技术结合双抗体夹心法进行检测样品中的甲胎蛋白抗原。 标本 血清 血浆 羊水标本,在室温可稳定7天,在0℃-4℃可稳定一个月,在-20℃可稳定2个月. 仪器 美国雅培全自动生化分析仪Abbott Ci8200 试剂 I2000SR AFP试剂盒(LIST No.7A48-20) 磁性微粒子包被的Anti-AFP 27.0ml。 吖啶酯标记的Anti-AFP 26.3ml 样本稀释液:53.0ml 预激发液 激发液 缓冲液 校准品 名称:美国雅培i2000SR AFP校准品 list no:1E65 规格:CAL L1 3X5ml 0ng/ml CAL L2 3X5ml 50ng/ml 稳定性:液体型,直接使用.校准稳定期至同批号试剂的效期,不同批号试剂更换时需定标,质控品出控时需定标. 贮存:未开瓶2-8℃保存至效期,开瓶2-8℃保存7天. 校准操作程序 在Snapshot屏幕上选择ORDER图标,在下拉菜单中选择 CALIBRATOR ORDER 输入架ID(C)和位置(P),在ASSAYS 屏幕拉选框选中该项目,选择F3 ADD ORDER完成申请.返回到snapshot屏幕,选择运行模块,按RUN 键执行定标. 质控品 名称:美国雅培i2000SR AFP质控品list no:1E65 批号: 稳定期: 2-8℃贮存,稳定至效期. 频度:三个水平浓度,每24hr测定一次. 程序: 在Snapshot屏幕上选择ORDER图标,在下拉菜单中选择CONTROL ORDER 输入架ID(C)和位置(P),在ASSAYS 屏幕输入该检测项目,检查质控批号,选择质控水平, 选择F2 ADD ORDER完成申请.返回到snapshot屏幕,选择运行模块,按RUN 键执行. 操作分析步骤 在样品检测过程中，微粒子（磁性微粒子包被的捕捉分子）与样品在反应杯中混合，在孵育过程中，样品中的被分析物与微粒子上的捕捉抗原相互反应结合，形成免疫复合物。 孵育后，磁石将磁性微粒子（包括特异性的分析物）吸附在反应杯的管壁上，反应复合物被清洗去除未结合的物质，然后继续进行测定。 反应复合物在反应杯中与吖啶酯标记的连接物反应结合，反应结束后，反应复合物被清洗去除未结合的物质。 预激发液（H2O2）被加入进行本底读数， 然后系统在反应复合物中加入激发液（NaOH），吖啶酯在过氧化物和碱性溶液中发生氧化反应，这引起化学发光反应的发生。N-methylacridone形成并释放能量（光发射），并返回到基态。 CMIA光路系统通过预先确定好的时间读取化学发光发射的量（活动读数），可计算分析物的浓度 生物参考范围 血清：平均小于13.4ng/ml 注意事项 黄疸血清,严重溶血,高脂血症,混浊血清均可影响检测结果,应避免. 操作性能 线性: 精密度:按照NCCLS议案EP5-A执行,总的CV%值1.0-1.9. 临床意义 AFP用于定量测定人血清或血浆中甲胎蛋白： 1. 测定人血清或血浆用于非精原细胞瘤的睾丸 癌病人的治疗. 2. 测定人血清,血浆和羊水用于在15~21周孕妇中筛查胎儿神经管开放缺陷(NTD).测试结果配 合超声波检查和羊膜窜刺术可安全且有效的筛查胎儿神经管开放缺陷. 参考文献 1美国雅培制药有限公司试剂说明书 2临床免疫学和免疫检验 第三版 人民卫生出版社 3 全国临床检验操作规程 第三版