第25章临床酶法分析的原理与方法.pptVIP

第二十五章临床酶法分析的原理与方法 1 2 缺点 催化该反应的POD对底物专一性差，标本中其它过氧化物也可一起被转化，使测定结果偏高。 反应过程中可受到数十种还原性物质的干扰。 常采用双试剂剂型排除干扰。 应用抗坏血酸氧化酶和胆红素氧化酶加入试剂Ⅰ中，可排除样本中维生素C和胆红素干扰。 第五节 酶循环测定的原理与方法 酶循环测定法是酶法分析的发展和延伸。酶循环测定法的关键技术是利用酶促反应中的酶在反应前后质和量都不改变的特性，只要有足够的底物，即可一直催化反应下去，底物靠其生成的非信号产物循环提供，使可测信号越来越大，提高了检测的灵敏度。 酶循环测定法利用底物和辅酶之间的循环反复反应，只需要有少量的底物和辅酶，就可使待测物的酶促反应产物不断扩增，扩增量决定于循环次数。反应产物增加，提高了检测灵敏度，减少了共存物质的干扰，达到高灵敏度和高特异性的要求。 产物循环-氧化酶-脱氢酶系统使用两种酶，即一种氧化酶作用后使底物发生氧化，氧化产物经一种脱氢酶催化其回到还原状态，促使底物和底物的氧化产物进入循环。在底物和产物循环的同时伴有H2O2的生成和NADH向NAD+的转变 （图25-1） 。 一、产物循环氧化酶脱氢酶系统 图25-1 产物循环-氧化酶-脱氢酶系统 底物循环-脱氢酶-辅酶系统中底物（或衍生物）及其氧化产