第四章固相析出分离法2013.pptVIP

三、提高晶体质量的途径 工业上通常希望得到粗大而均匀的晶体，便于过滤与洗涤。 （一）晶体大小 影响晶体大小的主要因素有过饱和度、温度、搅拌速度、晶种等。 * （二）晶体形状 改变晶体外形，可用:选择不同的溶剂、控制过饱和度、结晶温度、调节溶液的pH和有目的地加入某种能改变晶形的杂质等。 （三）晶体纯度 晶体表面具有一定的物理吸附能力。 重结晶：即将晶体用合适的溶剂溶解再次结晶。 * （四）重结晶(recrystallization) 溶解度受温度影响较大的物质，将产品溶解在热的溶剂中，缓慢降低温度析出晶体。 将溶质溶于一种溶剂中，然后将第二种溶剂加热后缓缓地加入，放置一段时间使结晶完全 。 * 红霉素重结晶 * 用于生物物质重结晶的溶剂一般有蒸馏水、丙酮、石油醚、乙酸乙酯、低级醇等。 思考题： 1.什么是盐析作用？盐析的原理是什么？如何选择盐析所用的中性盐？ 2.有机溶剂沉淀的原理是什么？影响沉淀效果的因素有那些？ 胰岛素纯化： 胰岛素 pH8 除去碱性杂蛋白 pH3 除去酸性杂蛋白 * 金属离子沉淀：与生物分子的酸性功能团作用的金属复合盐法； 有机酸类复合盐沉淀:与生物分子的碱性功能团作用的有机酸复合盐法（如苦味酸盐、苦酮酸盐、丹宁酸盐等）。 * 二、成盐沉淀法 1．金属离子沉淀： Mn2+、Fe2+、Co2+、Ni2+、Zn2+、Ca2+、Ba2+、Mg2+等； 2．有机酸类复合盐沉淀 （1）丹宁即鞣酸 （2）雷凡诺 （3）三氯乙酸（TCA） * 雷凡诺 * 猪心提取液 洗脱液 上清液 上清 细胞色素C 沉淀（去除） * 吸附 人造沸石 盐析 45%饱和硫酸铵 沉淀 TCA 透析 三、亲和沉淀 利用亲和反应原理，将配基与可溶性的载体偶联后形成载体-配基复合物（亲和沉淀剂），该复合物可选择性地与蛋白质结合，在一定条件下沉淀出来。 中性可溶，酸性沉淀。 * * 四、高分子聚合物沉淀 水溶性非离子型高分子聚合物，如不同分子量的聚乙二醇（PEG）、葡聚糖、右旋糖苷硫酸酯等，能使蛋白质水合作用减弱而发生沉淀。 五、表面活性剂 十六烷基三甲基季胺溴化物（CTAB） 十六烷基氯化吡啶（CPC） * } 酸性多糖 * 六、选择性变性沉淀法 热变性沉淀法 酸碱变性沉淀法 利用试剂（氯仿） * 第四节 结晶(crystallization) 溶液中的溶质在一定条件下，因分子有规则的排列而结合成晶体，晶体的化学成分均一，具有各种对称的晶体，其特征为离子和分子在空间晶格的结点上呈规则的排列。 固体有结晶和无定形两种状态。 结晶：析出速度慢，溶质分子有足够时间进行排列，粒子排列有规则 无定形固体：析出速度快，粒子排列无规则-沉淀。 * 只有同类分子或离子才能排列成晶体，因此结晶过程有良好的选择性。 通过结晶，溶液中大部分的杂质会留在母液中，再通过过滤、洗涤，可以得到纯度较高的晶体。 结晶过程具有成本低、设备简单、操作方便，广泛应用于氨基酸、有机酸、抗生素、维生素、核酸等产品的精制。 AFM（原子力显微镜）下的抗生素晶体 AFM下的抗生素晶体层 一、结晶过程 饱和溶液：当溶液中溶质浓度等于该溶质在同等条件下的饱和溶解度时，该溶液称为饱和溶液。 过饱和溶液：溶质浓度超过饱和溶解度时，该溶液称之为过饱和溶液。 溶质只有在过饱和溶液中才能析出。 溶质溶解度与温度、溶质分散度（晶体大小）有关。 凯尔文（Kelvin）公式： 指溶质自动从过饱和溶液中析出形成新相的过程。 C2 — 小晶体的溶解度；C1 — 普通晶体的溶解度； ρ — 晶体密度；M — 晶体质量； σ — 晶体与溶液间的界面张力； γ2 — 小晶体的半径； γ1 — 普通晶体的半径； * 结晶过程的实质 结晶是指溶质自动从过饱和溶液中析出，形成新相的过程。 这一过程不仅包括溶质分子凝聚成固体，还包括这些分子有规律地排列在一定晶格中，这一过程与表面分子化学键力变化有关。 因此，结晶过程是一个表面化学反应过程。 晶体的形成 形成新