细胞核的分离与核酸的鉴定讲解材料.pptVIP

实验6 细胞核的分离与核酸的鉴定（Separation of cell nuclei and identification of nucleic acids） 遵义医学院生化教研室 1.掌握离心技术的原理及离心机的使用； 2.熟悉提取分离细胞核、细胞质的方法； 3.熟悉鉴定核酸的方法； 一、核酸的种类及其分布 请思考？ DNA、RNA在细胞中的分布： DNA 胞核内(98%) 胞质内(2%) RNA 胞核内(10%) 胞质内(90%) 核酸的种类： DNA、RNA 结论：DNA主要存在于细胞核， RNA主要存在于细胞质。 二、分离细胞质与细胞核 　１.破碎细胞 细胞破碎的方法 机械法 高速组织捣碎机 玻璃匀浆器 研钵 物理法 超声匀浆器 冻融法 化学法 自溶法 酶处理 表面活性剂处理法 利用各细胞器在一定介质中的沉降速度的差异，可采取离心的方法，将细胞器分离出来。 ２.离心技术 细胞器沉降先后顺序先后是细胞核、线粒 体、溶酶体和其他微体、核糖体和大分子。 离 心 方 法 差速沉降离心法 速率区带离心法 等密度区带离心法 密度梯度区带离心法 √ √ 差速沉降离心法 (differential centrifugation) 采用逐渐增加离心速度或低速和高速交替