控制菌检查用培养基适用性检查操作规程.docVIP

XXX中药 饮片有限公司 工作标准 编号：SOP-QC-000-1.0 控制菌检查用培养基适用性检查操作规程 执行日期： 第 第 PAGE 1 页 共 NUMPAGES 3 页 文件批准表 职责 部门及职责 姓名 签名 日期 起草 部 相关部门审核 QA审核 质量管理部 部门审核 部 批准 质量负责人 文件复审日期 1目的 建立一个控制菌检查用培养基检查操作程序。 2适用范围 控制菌检查中用的培养基。检查项目包括培养基的促生长、指示和抑制特性能力。 3发放范围 质量部 4职责 责 任 人 职 责 质量部 负责起草执行该文件。 5内容 5.1菌种和菌液制备 5.1.1控制菌检查用培养适用性检查试验用菌株。 大肠埃希菌（Escherichia coli) [CMCC(B0 44102] 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus) [CMCC(B0 26003 乙型副伤寒沙门菌 铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa) [CMCC(B) 10104 生孢梭菌(Clostridium sporgenes) [CMCC(B) 64941] 白色念珠菌Candida albicans) [CMCC(B) 98001] 5.1.2将金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、沙门菌分别接种于胰酪大豆胨液体培养基中或在胰酪大豆胨琼脂培养基上，30-35℃培养18-24小时，将白色念珠菌接种于沙氏葡萄糖琼脂培养基上或沙氏葡萄糖液体培养基中，20-25℃培养2-3天，将生孢梭菌接捉于梭菌增菌培养基中置厌氧条件下30-35℃培养24-48小时或接种于硫乙醇酸盐液体培养基中30-35℃培养18-24小时。 5.2各种培养基需要测试的能力及判断指标 5.2.1液体培养基促生长能力检查，取不大于100cfu的试验菌分别接种于被检查培养基和对照培养基中，在相应控制菌检查规定的培养温度及不大于规定的最短培养时间下培养。增菌培养基多澄清液体培养基，与对照培养基比较，被检查培养基中试验菌应生长良好，表现为液体培养基浑浊。 固体培养基促生长能力检查：取试验菌液（含菌数不大于100cfu）分别涂布于被检查培养基和对照培养基上，在相应控制菌检查规定的培养温度及不大于规定的最短时间下培养，与对照培养基比较，被检查培养基与对照培养基上生长的菌落大小、形态特征应一致。若被检查培养基上的菌落平均数与对照培养基上的菌落数的比值应在50-200%，且菌落形态、大小与对照培养基上的菌落 一致，则判断该培养基的适用性检查促生长能力符合规定。 5.2.2培养基抑制能力检查：取不少于100cfu的试验菌分别接种于被检查培养基和对照培养基，在相应控制菌检查规定的培养温度及不不小于规定的最长培养基时间下培养，试验菌应不得生长。 5.2.3液体培养基指示能力检查：取不大于100cfu的试验菌分别接种于被检培养基和对照培养基中，在相应控制菌检查规定的培养温度及不大于规定的最短培养时间下培养。与对照培养基比较，被检查培养基中试验菌应生长情况/指示剂反应等应与对照培养基一致。 固体培养基指示能力检查：取试验菌液（含菌数不大于100cfu）分别涂布于被检查培养基和对照培养基上，在相应控制菌检查规定的培养温度及不大于规定的时间下培养，与对照培养基比较，被检查培养基与对照培养基上生长的菌落大小、形态特征、菌落颜色及指示剂反应等应一致。 5.3控制菌检查用培养基能力测试列表 控制菌检查涉及的14种培养基特点各异味，表中概述培养基检查的具体项目，具体操作在其后说明。 表1 控制菌检查用培养基的促生长能力、抑制能力和指示特征 控制菌的检查 培养基 特征 试验菌株 耐明盐革兰阴性菌 肠道菌增菌液体培养基 促生长能力 大肠埃希菌、铜绿假单胞菌 抑制能力 金黄色葡萄球菌 紫红胆盐葡萄糖 琼脂培养基 促生长能力+指示特征 大肠埃希菌、铜绿假单胞菌 大肠埃希菌 麦凯康液体培养基 促生长能力 大肠埃希菌 抑制能力 金黄色葡萄球菌 麦凯康琼脂培养基 促生长能力+指示特征 大肠埃希菌 RV沙门菌增菌液体培养基 促生长能力 乙型副伤寒沙门菌 抑制能力 金黄色葡萄球菌 木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基 促生长能力+指示特性 乙型 副伤寒沙门菌 三糖铁琼脂培养基 指示能力 乙型 副伤寒沙门菌 溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基 促生长能力 铜绿假单胞菌 抑制能力 大肠埃希菌 甘露醇氯化钠琼脂培养基 促生长能力+指示特性 金黄色葡萄球菌 抑制能力 大肠埃希菌 梭菌增菌培养基 促生长能力 生孢梭菌 哥伦比亚琼脂培养基 促生长能力 生孢梭菌 沙氏葡萄糖液体培养基 促生长能力 白色念珠菌 沙氏葡萄糖琼脂培养基 促生长能力+指示特性 白色念珠菌 念珠菌显色培养基 促生长能力