第13章分子生物学研究技术简介.ppt

第13章 分子生物学研究技术简介 分子生物学理论的产生与发展有赖于其技术体系的建立与进步，有关分子生物学研究方法与手段方面的内容，在专门的书籍中都有详细的论述。出于对本书内容的系统性和完整性方面的考虑，只简要地介绍分子生物学研究中最常用的实验技术与手段，其中有些内容放在了相关的章节中(如质粒DNA的提取纯化、核酸的超速离心、凝胶电泳和分子杂交等在第2章)介绍。 13.1 DNA分子克隆的基本原理 DNA重组技术兴起于20世纪70年代初期。1972年Berg等将λ噬菌体基因和大肠杆菌乳糖操纵子插入到SV40 DNA中，首次构建了DNA重组体(recom-binant)。次年，Cohen和Boyer将细菌质粒通过体外重组后导入大肠杆菌，得到了基因的分子克隆(molecular cloning)，由此诞生了基因工程。 基因工程是对携带有遗传信息的核酸分子进行设计、重组和加工的分子工程，包括基因的重组、克隆和表达。这个术语既可用来表示对特定基因的操作，也可泛指它所涉及的相关技术体系，其核心是构建重组体DNA，因此基因工程和重组体DNA技术有时是同义词。 重组体DNA技术是指在体外将不同来源的DNA分子进行重新组合，并使它们在适当的宿主细胞中实现增殖表达的遗传操作。而基因工程技术是指在分子水平上进行操作，在细胞水平上实现表达，其过程主要包括获得