SDS-电泳 课件统一模板.pptVIP

六.思考题 1.SDS与PAGE的区别有那些？ 2.浓缩胶浓缩样品的原理是什么？ 3.在不连续体系SDS中,分离胶与浓缩胶中均含有TEMED和APS,试述其作用? 4.小鼠不同组织中蛋白质组成有无不同？其原因是什么？ * * 实验原理 SDS的特点 主要由聚丙烯酰胺凝胶特性而体现： (1)在一定浓度时，凝胶透明，有弹性，机械性能好； (2)化学性能稳定，与被分离物不起化学反应，在很多溶剂中不溶； (3)对pH和温度变化较稳定； (4)几乎无吸附和电渗作用，只要Acr纯度高，操作条件一致，则样品分离重复性好； * (5)样品不易扩散，且用量少，其灵敏度可达10-6g (6)凝胶孔径可调节，根据被分离物的分子量选择合适的浓度，通过改变单体及交联剂的浓度调节凝胶的孔径； (7)分辨率高，尤其在不连续凝胶电泳中，集浓缩、分子筛和电荷效应为一体。因而较醋酸纤维薄膜电泳、琼脂糖电泳等有更高的分辨率。 电泳原理 1 * 电泳凝胶 （可以加样品，内含缓冲液，可导电） 浓缩胶 分离胶 电泳原理 2 * 缓冲液密闭槽（上） 缓冲液密闭槽（下） 电流方向 电泳仪 电流方向 电流方向 电泳仪 * 聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺 (简称Acr) 和交联剂N，N’—亚甲基双丙烯酰胺（简称Bis）在催化剂（过硫酸铵和四甲基乙二胺（TEMED））的作用下，聚合交联而成的具有网状立体结构的凝胶，这种凝胶具有分子