食品中毒素的检测.ppt

食品中毒素的检测 2011级生物技术 第三组 美味的外表之下深藏着毒素一 常见的动物性天然毒素 动物肝脏中的毒素 河豚毒素 岩蛤毒素 螺类毒素 组胺 1 动物肝脏中的毒素 大家对动物肝脏的认识也许仅仅是美味和含维生素A可以治疗夜盲症。 动物中主要的毒素有胆酸，牛磺胆酸和脱氧胆酸。他们都是中枢神经系统的抑制剂,其中牛磺胆酸的毒素最强。 脱氧胆酸对结肠癌，直肠癌的发生有促进作用。所以食用过多或食用时处理不当，都会对身体造成伤害。 2 河豚毒素 河豚鱼是一种味道鲜美却含剧毒的鱼类。它的肝脏，皮肤，血液等都有剧毒，其中卵和卵巢的毒性最大。河豚鱼中毒是世界上最严重的动物性食物中毒。 3 岩蛤毒素 它的毒素源于一些属于膝勾藻科的藻类，这种藻类大量繁殖可引起赤潮。摄食这种藻类，他所含的岩蛤毒素及膝勾藻毒素一无毒状态积累在肠腺中，当摄食蛤肉后，毒素被释放出来。 4 螺类毒素 绝大多数食用安全性较高，但少数种类含有有毒物质。 5 组胺 组胺属于生物碱，易溶于水，是由于鱼体内的游离组氨酸在鱼中存放过程经脱胺而形成的。 组胺中毒大多由于食用不新鲜或腐败变质的鱼类引起的。它能在弱碱条件下，与偶氮反应生成橙色物，从而被定性和定量检测。 食品中毒素的检测 挥发性盐基氮的检测 水产品中组胺的测定 棉籽油中棉酚含量的检测 马铃薯毒素的检测 黄曲霉素B1的检测 （二）水产品中组胺的测定 1.原理 鱼体中的组胺用正戊醇提取，遇偶氮试剂显橙色，与标准系列比较定量。 2.试剂 正戊醇 碳酸钠溶液（50g/L） 三氯乙酸溶液（100g/L） 氢氧化钠溶液（250g/L） 等试剂 3.实验步骤 （1）样品处理 称取5~10g绞碎并混合均匀的试样，置于具塞锥形瓶中，加入15.0~20.0mL三氯乙酸溶液，浸泡2~3h，过滤。吸取2.0mL滤液，置于分液漏斗中，加氢氧化钠溶液使呈碱性。每次加入3mL正戊醇，振摇5min，提取3次，合并正戊醇提取液于分液漏斗中，每次加3mL盐酸溶液（1+11）振摇提取3次，合并盐酸提取液并稀释至10.0mL，备用。 （2）测定 吸取2.0mL盐酸提取液于10mL比色管中。另吸取0.00mL、0.20mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL、1.00mL组胺标准使用液（相当于0mg、4mg、8mg、12mg、16mg、20mg组胺），分别置于10mL比色管中，加水至1mL，再各加1mL溶液（1+11）。试样及标准试管各加3mL碳酸钠溶液、3mL偶氮试剂，加水至刻度，混匀，放置10min后用1cm比色杯以零管调节零点，于480nm波长处测吸光度。绘制标准曲线比较，或与标准系列目测比较。 （3）计算结果 （三）棉籽油中棉酚含量的检测 我国种植的棉花属于陆地棉及草棉,棉籽中常含有0.15%~2.8%游离棉酚.冷榨棉籽油时,大部分棉酚转入棉籽油中,可高达1%~3%.食用冷榨棉籽油或毛棉籽油,极易引起中毒.棉籽油中含有0.02%游离棉酚对动物健康无影响,0.05%以上时对动物有危害,国标规定,棉籽油中游离棉酚=0.02％. （四）、马铃薯毒素的检测 Ｄ．确证试验 为确认薄层样上样液荧光系由黄曲霉素Ｂ１产生的，加滴三氟乙酸，ＡＦＴＢ１的衍生物，展开后此衍生物的比移值在０.１左右。与薄层板左边依次滴加两个点。 第一点：１０ｕｌ　ＡＦＴＢ，标准使用液（０.０４ｕｇ／ｍｌ） 第二点：２０／ｕｌ样液于以上两点各加一小滴三氟乙酸盖于其，反应５ｍｉｎ后用吹分机吹热风２ｍｉｎ，再于薄层板上滴加以下两点。 第三点：１０ｕｌ０．０４ｕｇ／ｍｌＡＦＴＢ１标准使用液。 第四点：２０ｕｌ样液。 按上法展开并观察，样液是否产生与ＡＦＴＢ１标准点相同的衍生物。未加三氟乙酸的三，四两点，可依次作为标准与标准的衍生物空白对照。 紫外分光光度法 原理:样品中游离棉酚经用丙酮提取后,在378nm有最大吸收，其吸收值与棉酚量在一定范围内成正比，与标准系列比较定量。 试剂与仪器: 仪器：紫外分光光度计 试剂:a.丙酮70％：将350mL丙酮加水至500mLb.配制棉酚标准使用液：吸取棉酚标准溶液5.0ｍＬ，置于100ｍＬ容量瓶中，加70％丙酮稀释至刻度，此溶液每毫升相当于50.0μg棉酚。 主要分析步骤提取：称取1.00ｇ三级棉籽油置于100ｍＬ具塞锥形瓶中，加入20.0ｍＬ70％丙酮,并加入玻璃珠３～５粒，在电动振荡器上振荡３０ｍｉｎ，然后在冰箱中放置过夜.上清液，过滤。 标准系列制备：吸取 0.0 、0.1、0.2 、0.3、 0.4 、0.5、 0.6 ｍＬ棉酚标准使用液（相当于5,10,15,20,25,30μg棉酚）,分别置于１０ｍＬ具塞试管中，各加70％丙酮至10ｍＬ，密塞混匀，静置10min。测定吸光值:取滤液