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三重四级杆质谱仪原理
内容
质量分析
– 基础知识
– 质量分析器的性能特点
• 分辨率
• 准确率
• 质量范围
多级质量分析
– 什么是多级质谱?
– 多级质谱如何工作?
– 碰撞诱导解离(CID)
– 采集方式
• SRM
• MRM
QQQ的优点(选择性、灵敏度和速度)
质量分析: 基本基础知识
在质量分析器里所产生的离子是根据他们的质荷比(m/z).进行分离的
质荷比
与小分子不同,一个更大分子的同位素质量簇中丰度最大的离子可能不是最低同位素质量。注意这个变化是同位素分布,它将影响你分析的结果。
质量分析器的性能特点
分辨率= M/ΔM
分辨率为200时,准确率是~2000ppm
分辨率为2500时,准确率是~100ppm
准确率(ppm级误差的例子)
一个质量为1000 道尔顿的化合物
1000 ± 2.0 Da (or ± 2000 ppm)
1000 ± 0.5 Da (or ± 500 ppm)
1000 ± 0.1 Da (or ± 100 ppm)
1000 ± 0.01 Da (or ± 10 ppm)
1000 ± 0.002 Da (or ± 2 ppm)
一个单四极杆质谱仪
四极杆质量过滤器
合成电压在两个对杆上数量是相同的,极性是相反的。
四极杆质量过滤器如何工作的?
四极杆质量过滤器稳定性图表
马修稳定图
选择性离子监测与全扫描对比
三重四极杆与其他液相/质谱联用技术的比较
– 在质谱应用领域里三重四极杆是最灵敏和定量重现性最好的仪器。
– 在质谱应用领域里三重四极杆在执行中性丢失扫描和母子扫描模式具有最好的灵敏性和准确性。
三重四极杆不是最好的获取质谱图的仪器,平行测量的质谱系统会更好些:
• 三重四极杆质谱/质谱不如离子阱质谱仪( TRAPS )灵敏(定性)
• 三重四极杆质谱不如飞行时间质谱仪(TOF)所获取的质谱图那么
有说服力(定性)
质量分析器的性能特点
• 质量范围
– 不同类型质量分析器质荷比的范围。四极杆分析器典型的扫描范围高达3000 m/z。
多级质量分析——质谱/质谱方式的介绍
多级质量分析
通常通过由惰性气体分子,例如氮气,氩气或氦气,碰撞
所选择的分子离子来实现的。这个过程就是所谓的碰撞诱
导解离(CID)。
对所得的碎片离子进行质量分析。
碎片离子被用于对原来的分子离子的结构判断。
多质谱分析可用于缩氨酸顺序,碳水化合物的结构特性,
低聚核苷酸以及酯类药物类的分子等的测定。
什么是碰撞诱导解离(CID)?
这是一个通过中性分子的碰撞把能量传递给离子的过程。
这种能量传递足以使分子键断裂和所选择的离子重排。
为什么它那么重要?
在70年代初期McLafferty (JACS, 95, 3886, 1973) 论证了从离 子观测得的键断裂和重排,表明了CID是中性分子的分子 结构的典型代表。
结构阐述
用主要的分裂机理方式解释CID谱图。
多级质谱分析
两种型号的质谱
时间串联的质谱
空间串联的质谱
时间串联多级质谱分析:通过离子阱质量分析器实现
时间串联多级质量分析是通过同一个分析器实现的,分离出所需的离子,使之断裂,并分析碎片离子。
时间串联的多级质谱: 离子阱(质谱n)
离子在离子阱中静电捕获(无线电频率场见下图)
通过改变阱里的电场,从而选择特定的离子留在阱里, 把其他的排除出离子阱。
在与惰性气体原子(氦,氩或者氮)碰撞后,所选择的离子被激活,所产生的更大动能使它们变成碎片。
所得的碎片离子通过分析后,得到碎片离子谱图。
时间串联的多级质谱:优点
• 离子阱的一个优点就是它们能够分离出某种离子,把其他的离子排除出离子阱。
• 被分离的离子能够通过CID的方式变成碎片然后被测定。
• 质谱/质谱试验能快速进行。
• 离子阱允许对碎片离子和碎片片段进行多重质谱/质谱(aka MSn)实验,以获得更多的结构信息。
• 另外一个优点就是它们能够富集离子,以提供更好的离子信号。
时间串联的多级质谱:缺点
• 缺乏三重四极杆(QQQ)类型的母离子扫描和和中性丢失 扫描的高灵敏度。
• 因为空间电荷效应的影响,离子阱的 动态范围有限。因为如果过
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