第1讲基因工程概论.ppt

;生物技术核心课程;◆教学目的与要求 ;◆教学目的与要求 ;◆教学目的与要求 ;◆教材与参考书 ;基因工程原理纲要;第一讲 基因工程概论; 现代生物技术;◆生物技术发展历程 ;◆生物技术发展历程 ;◆生物技术发展历程 ;◆现代生物技术的含义;◆现代生物技术的目的;◆现代与传统生物技术的区别;◆现代生物技术研究的主要内容;◆蛋白质工程;◆酶工程;◆发酵工程;◆细胞工程;◆细胞工程;◆细胞工程;◆克隆技术;第一讲 基因工程概论;2、基因研究的发展;2、基因研究的发展;2、基因研究的发展;◆（1）基因学说的创立;Mendel临终前说；;◆（1）基因学说的创立;◆（1）基因学说的创立;◆（1）基因学说的创立;2、基因研究的发展;◆（2）基因与DNA分子;图1.1 转化过程的核心是DNA 这个结果说明了原核生物的遗传物质是也是DNA，还为细菌和高等生物的遗传提供了一种独特的观点。 ;原文对图1.1的结果是这样分析的：这种引入的物质，就它的化学和物理性质而言，看起来是高度聚合且有粘性的DNA。另一方面，III 型外壳多糖的合成是由可转移的物质激发的，它是由不含氮的多糖组成。因此我们认为，引入的物质以及反过来产生的产物在化学上是不同的，在功能上有生物特异性，两者对于决定它们所在细胞的特异性是必须的。 这个讨论描述了遗传物质及表达产物之间的区别，为后来的研究奠定了重要的理论基础。 ;当可转移分子被发现由DNA组成之后，下一步需要证明的就是DNA可在一个完全不同的体系中提供遗传物质。 1952 年，Hershey和Chase用放射性标记T2噬菌体感染细菌 (32P 标记DNA，35S标记蛋白质) 的实验进一步说明了不管是在细胞基因组中还是病毒中，遗传物质就是DNA这一结论。 图 1.2 说明了这个试验的结果。 ;图 1.2 T2 噬菌体的遗传物质被证明是DNA(捣碎实验)。 本实验直接表明父代噬菌体的DNA进入到细菌中，变成了子代噬菌体的一部分，恰好符合是遗传物质的遗传特性。 ;◆（2）基因与DNA分子;◆（2）基因与DNA分子;图 1.3 多核糖键是由一系列5’—3’糖-磷酸键作为主链和含有碱基突出组成的。 ;图 1.4 由于嘌呤碱基总是与嘧啶碱基配对，因此双螺旋的宽度是恒定的，图中序列为T-A、C-G、A-T、G-C。 ;图 1.5 DNA的双链构成双螺旋;图 1.6 碱基配对是DNA复制原理的基础。;图 1.7 DNA 的复制是以半保留方式进行的。;不管是杂合双体还是纯合双体，其中任何一条链要么是含重原子的要么是含轻原子的。1958年的Meselson-Stahl实验证实了这一观点，在这个实验中观察了三代酵母菌的DNA复制。从细胞中提取出DNA，离心测量其密度，则DNA按密度分成三带：最重的是母体，杂合体是第一代，第二代中一半是杂合体一半是纯合双体。(图 1.7);图 1.8 复制叉是指从未解旋的母链向新复制的子链过度的区域。 ;◆ （2）基因与DNA分子;◆ （2）基因与DNA分子;◆（2）基因与DNA分子;◆（2）基因与DNA分子;2、基因研究的发展;◆（3）基因与多肽链;◆基因的碱基顺序与蛋白质的氨基酸顺序对应关系？;RNA;在生命的初始阶段，中心法则是：??;1981年，美国生物学家切赫(T. Cech)等发现四膜虫26S rRNA前体的自我剪接作用，随后又证明前体中的居间序列(intervening sequence，IVS)有五种酶的活力。几乎在同时，Altman从纯化的RNase P中，证明催化tRNA前体成熟的催化剂是RNase P中的RNA。以后又发现RNA自己不需要蛋白质的帮助，就可以用氨基酸合成肽链。;mRNA分子上从5′至3′方向，由AUG开始，每三个相邻的核苷酸为一组，在蛋白质合成中代表某种氨基酸或其他信息，称为密码子或三联体密码(Triplet Code)，统称为遗传密码（genetic codon)。 反密码子： 转运RNA能与信使RNA的碱基相互配对的三个相邻碱基。;密码比(coding ratio)问题 密码是否同叠？ 三联体之间是否存在“逗号”？ 三联密码子编码的破译 ;1954年，物理学家George Gamov根据在DNA中存在4种核苷酸，在蛋白质中存在20种氨基酸的对应关系，做出数学推理，认为只有43=64这种关系是理想的。 1961年，Brenner和Crick根据DNA链与蛋白质链的共线性(colinearity)，首先肯定了3个核苷酸的推理。随后的遗传学实验证实，是由3个碱基编码一种氨基酸，人们称这种碱基三联体为密码子(codon)。;在1962年，用大肠杆菌提取液进行体外合成试验，加入细菌病毒f2的RNA，结果合成了一个与天然的f2外壳蛋白完全相同的蛋白质，其氨基酸顺序完全一样。这便证