第五章分光光度法.pptVIP

第五章 §4 分光光度法 物质对光的选择性吸收和吸收光谱 光的吸收定律 分光光度计 定量分析方法 一、物质对光的选择性吸收和吸收光谱 （一）物质的颜色和光的波长的关系 同种物质，C不同，但?max都相同——定性分析 溶液的浓度愈大吸收光愈强——定量分析 二、光的吸收定律 四、定量分析法 （二）标准对照法 （三）测量条件的选择 入射光波长的选择 （三）测量条件的选择 吸光度读书范围的选择 （三）测量条件的选择 参比溶液的选择 小结 基本概念：A、T、?、a及其关系 Lambert-Beer定律以及应用 分光光度法应用——定性、定量测定 测定方法：标准曲线法、标准对照法 * * * 分光光度法是根据物质的吸收光谱和光的吸收定律，对物质进行定量、定性分析的一种仪器分析方法。 所选用的光源 紫外分光光度法 特点：灵敏度高------10-5 mol/L ~10 -6 mol/L 相对误差小------2%~5% 应用广泛-----医药、卫生、环保、化工 可见分光光度法 红外分光光度法 光是一种电磁波。自然光是由?不同的电磁波组成的混合光。 可见光， ?在400~760nm范围。（见表5-4） 可见光的电磁波谱图 紫 400 红 660 橙 600 黄 560 绿 530 青蓝 450 蓝 420 青 500 互补色光： 黄光和蓝光； 紫光和绿光。 溶液的颜色实质是它所吸收的色光的互补色。 如：日光照射KMnO4，其中绿光被吸收，故溶液呈紫色。 CuSO4呈蓝色是由于溶液吸收了黄光。 溶液越浓，光选择吸收越多，颜色越深 比较溶液颜色的深浅，实质比较溶液对光的吸收程度。 ?max=519 ? A 480 520 560nm 最大吸光度相对应的波长称为最大吸收波长 ，?max （二）吸收光谱曲线 横坐标?；纵坐标A。 ?max A = -lgT =lg 透光率 吸光度 I0 It Ir Ia 透光率愈大，溶液对光的吸收愈少 吸光度愈大，溶液对光的吸收愈多 单位 b 液层厚度：cm c 物质的量浓度：mol · L-1 ? 摩尔吸光系数：L ·mol-1 ·cm-1 A = a b ? 单位 b 液层厚度：cm ? 质量浓度：g · L-1 a 质量吸光系数：L ·g-1 ·cm-1 Lambert- Beer 定律 A = ? b c ? = a M 例[5-5] 解： （1） A = a b ? 0.22 = a ? 2 ?140 ?10-6 a = 785.7[L/g ?cm] （2）? = a M = 785.7 ? 112.4 = 8.83 ?104 [L/mol ?cm] （3 A = - lgT = 0.22 lgT = -0.22， T = 10-0.22 = 0.60 = 60% [例1] Cd2+浓度为140mg/L，双硫腙法显色测定波长为520nm，液层厚度2cm，吸光度为0.22，求a、? 和T 三、分光光度计 分光光度计四大系统 光源系统 检测 器 吸收 池 分光系统 数据处理器 （一）标准曲线法 根据Lambert-Beer定律， A与C成正比 配制一系列标准液 C1、C2、C3??， 在?max下，测相应的A1、A2、A3……。 Ax Cx c（mg/L） A ?=550nm 40 80 120 200 0.6 0.4 0.2 0.0 配制与被测液（C样）相近浓度标准液（C标），在?max分别测得A标、A样。 例[5-6] 选择波长为?max的光作为入射光 1、 在?max处，溶液的吸光度最大，测定的灵敏度最高。 2、在?max附近，吸光度与浓度成线性关系。 溶液透光度值：T =20～65% (吸光度 A =0.70～0.20)。 溶剂空白 试剂空白 试样空白 空白溶液 *