提质粒酶切验证.docVIP

2010/11/24 根据跑胶结果初步认定：1，2，4，5为Pmd18Tvecter 认定8#可能是连接上的 认定3，6，7，9，12，13，16，17，19是同一样大的 认定10 14 15 18是大小一样的 认为11孔pmd18Tvector是自连的 注：14，15是同一管菌中提出来的，14是直接提的，15是用14的废液提的 选1作对照， 3，6，8，10，13，16，19用xba1做酶切 结果预期：为一个2490左右的片段，一个1068左右的片段37℃ Xba1 1μl BsaA 1ul Buffer m 1μl 2466Nagb-T 5μl H2o 2ul 最后一个孔是pet22b对照 所以只有一个有可能就是第六个孔对应的13032-nagB-pet22b 14# 拿来做hind 111酶切 结果预期：切下来一个762bp的片段和一个5482bp左右的片段 酶切体系37℃ HindⅢ 1μl. Buffer M 1μl. Atcc13032nagB-pet22b 5μl. H2o 3ul.  1，5孔为大小一样的质粒 2，4孔为大小一样的质粒 3，6孔为大小一样的质粒 选1 2 3 做xho1和Nco1双酶切 37℃ 预期一个一千多的片段一个5000多的片段 Xho1 1μl Nco1 1ul Buffer h 1μl An-pet15b 5μl H2o 2ul 酶切