农残分析12--农药残留的酶抑制法与免疫测定.pptVIP

农药残留的酶抑制法与免疫测定技术 6.1 酶抑制分析测定法 1951年,Giang与Hall应用有机磷和氨基甲酸酯农药在体外对胆碱酯酶具有抑制作用的机理来测定其含量. 1968年Mendoza利用薄层-酶抑制技术测定10种有机磷和氨基甲酸酯农药,最小检出量可达纳克水平. 1975年Kramer与Gamson用一种与靛酚乙酸酯相似的化合物,测定1~10μg的各种有机磷酸酯化合物,与此同时,Zweig等也测定了甲萘威等农药. 进入20世纪80年代,人们开始以来源丰富,取材和制备都十分方便的植物酶源,建立薄层-植物酯酶抑制方法,为酶抑制法的进一步推广和应用创造了条件. 6.1.2 酶法检测原理 有机磷和氨基甲酸酯类农药 对参与神经生理传递过程的乙酰胆碱酯酶AChE具有抑制作用,使该酶的分解作用不能正常进行,从而导致底物乙酰胆碱的积累,影响动物正常的神经传导,引起中毒或死亡. 可将这一昆虫毒理学原理应用到农药残留检测中,如果农产品样品提取液中不含有或含有很低的有机磷或氨基甲酸酯类农药,酶的活性就不被抑制,试样中加入的基质就被酶水解,或少部分水解, 水解产物与加入的显色剂反应产生颜色;反之,如果试样提取液中含有一定量的有机磷或氨基甲酸酯类农药, 酶的活性就被抑制,试