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- 2019-10-25 发布于江西
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(十)果蝇伴性隐性致死试验 野生型雄蝇 (圆形、红色眼) “Basc”雌蝇 (棒形、杏色眼) (棒形、杏色眼) (圆形、红色眼) a.每瓶在多于20个F2代(雌和雄)中没有红色圆眼的野生型雄蝇者为致死突变阳性。如有2只以上的红圆眼的野生型雄蝇者为阴性。仅有1只野生型或F2代总数不足20只者为可疑,需进行F3代观察。 b.仅存雌、雄亲本而无仔蝇者为不育。染毒组的突变率大于自发突变率的两倍,并有剂量-反应关系者为阳性效应。 结果判断 四、致突变试验中的一些问题 (一)阴性、阳性对照的设立 目的是获得实验的基础数据 1、阴性对照 2、阳性对照 通过对阳性物质的试验证明实验方法的可靠;验证实验者在本实验条件下,完成技术和鉴定致突变物的能力;证实经一段时间后,本实验的重复性。 许多化合物须经哺乳动物代谢才转变成致突变物,称为前致突变物(promutagen) (二)体外试验的活化系统 由于微生物和培养的哺乳动物细胞缺乏整体动物体内的许多代谢能力。在遗传毒理学试验中,必须加入代谢活化系统以检出前致突变物 使用完整的细胞,特别是大鼠肝原代细胞,与测试细菌或细胞一起培养。它有完整的细胞结构和各种酶及内源性辅助因子,代谢能力优于无细胞系统如S9,但不如体内活化系统。 1、哺乳动物细胞介导 经酶诱导剂处理后制备的肝匀浆,再经9000g离心分离所得上清液,加上适当的缓冲液和辅助因子。 2、S9 含有
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