高浓度臭氧注入猪蛛网膜下腔后脑脊液及脊髓病理学改变.docVIP

高浓度臭氧注入猪蛛网膜下腔后 脑脊液及脊髓病理学改变 田锦林 肖越勇 张金山 刘江涛 杨波 李家开 于淼 北京解放军总医院， 100853 近年来，臭氧椎间盘内注射治疗颈、腰椎间盘突出症已有较多报道，收到了良好的治疗效果。椎间盘突出症的臭氧消融术取得良好疗效的关键是合理的臭氧浓度、剂量及臭氧对髄核组织的充分氧化。而精确的穿刺是保证臭氧与髄核组织的能够充分接触的前提。根据突出物位置的不同，穿刺路径有别。对于包容性椎间盘突出，穿刺途径一般选用最常用的侧后方入路进入盘内，当盘内髄核被氧化，盘内压力下降后，突出髄核可望还纳；临床实际治疗中，由于采取的影像学导向方法不同、穿刺途径不同存在将臭氧误注入蛛网膜下腔的可能。侧后方入路穿刺针不经过椎管，一般没有误穿入蛛网膜下腔的危险。但对于非包容性椎间盘突出，为了达到臭氧与髄核组织的充分接触，可根据突出物位于患侧神经根的内侧或外侧的不同，穿刺入路有别。当突出物位于神经根内侧时，穿刺针经神经根与硬膜囊之间经突出物进入盘内；当突出物位于神经根外侧时，穿刺针经神经根与小关节突内缘之间经突出物进入盘内。这两种后路穿刺路径在实际操作过程中都有可能误穿入蛛网膜下腔的危险。当误穿进入蛛网膜下腔或臭氧进入蛛网膜下腔后，会不会造成类似于胶原酶误入蛛网膜下腔后引起的化学性脑脊髓膜炎？臭氧的强氧化作用会不会造成脊髓、神经根诸结构的损害？其脑脊液有无变化？国内外尚没有文献报道。 本研究目的在于观察高浓度臭氧注入猪蛛网膜下腔后脑脊液变化及脊髓病理形态学变化，为临床治疗椎间盘突出症时臭氧误入蛛网膜下腔的安全性提供实验依据。 选取8只小型猪(按普通级实验条件饲养,解放军总医院实验动物中心提供，山东淄博悦华医疗器械有限公司生产的医用臭氧发生器)，体重25～30 kg ,雌雄不限。经蛛网膜下腔注入10ml 90μg/ ml臭氧，术后1周、1月及3月重复上述步骤采集脑脊液进行常规及生化检验。分别在注射臭氧后30分钟、1周、1月及3月处死动物各2只，取得注射段脊髄标本。以甲醛溶液固定,作HE 染色,于光学显微镜(简称光镜)下观察。 实验结果表面：所有动物术后行为无明显行为异常，无明显跛行,无瘫痪。脑脊液常规检验所有脑脊液为无色，透明，蛋白定性阴性。生化检验在术前及术后各时间段未见明显变化，葡萄糖、氯化物、蛋白含量、细胞总数及白细胞数在术后各时间段测定值与术前相比无统计学差异。 大体标本观察：脊膜囊外观、光泽无异常，血管影清晰可见。脊髓、神经根均没有明显的变化。光镜下观察:各阶段脊髓、蛛网膜和软脊膜光镜下均未见明显异常改变，个别切片在硬脊膜和蛛网膜处有少许炎细胞浸润，蛛网膜下腔及脊髓内个别有血管扩张充血改变。 讨论 臭氧(O3)是由氧分子携带一个氧原子组成，化学性质极不稳定，在空气和水中都会慢慢分解成氧气，其反应式为：2O3 →3O2 ＋ 285kJ。臭氧在水中的分解速度比空气中快的多。在含有杂质的水溶液中臭氧迅速回复到形成它的氧气。在常温常态下，臭氧的半衰期约为20～30 min。臭氧的氧化能力极强，其氧化还原电位仅次于氟， 臭氧具有很强的氧化性，除了金和铂外，臭氧化空气几乎对所有的金属都有腐蚀作用。臭氧对非金属材料也有了强烈的腐蚀作用，即使相当稳定的聚氯乙烯塑料等都能被氧化腐蚀。 臭氧的医疗作用主要有：1）强氧化作用，具有瞬间强氧化性，随后还原成O2，变成稳定状态。可用于消毒、各种感染及椎间盘髄核的氧化消融等；2）抗炎作用，可通过刺激抗氧化酶的过度表达以中和炎症反应中过量的反应性氧化产物（reactive oxidative species，ROS），刺激拮抗炎症反应的细胞因子IL－1、IL－2、IL－8、IL－15、干扰素－a、肿瘤坏死因子－a和(或)免疫抑制因子如IL－10 、TGF－β1释放，刺激血管内皮细胞释放NO及血小板源性生长因子（Platelet-derived growth factor，PDGF）等引起血管扩张，从而达到促进炎症吸收的作用[1 ] ；3）镇痛作用，可通过抑制前列腺素的合成、缓激肽及致痛物质的释放而产生镇痛作用。 我们的研究表明：高浓度臭氧10ml注入猪蛛网膜下腔，各阶段脑脊液常规及生化均未见明显异常变化，鞘内诸结构病理学光镜下观察未见有阳性意义的改变，个别切片在硬脊膜和蛛网膜处有少许炎细胞浸润，蛛网膜下腔及脊髓内个别有血管扩张充血改变，可能与处死前穿刺蛛网膜下腔抽取脑脊液有关。说明大量高浓度臭氧注入蛛网膜下腔后没有对脊髓、神经根、蛛网膜和软脊膜造成明显损伤。如果存在损伤，很可能是化学性蛛网膜炎，脊膜炎，神经根炎，脊髓炎和小的梗死灶等，血脑屏障会遭到破坏，脑脊液会出现相应的异常改变，病理学会找到相应的损伤证据，如脊髓、神经根、蛛网膜和软脊膜肿胀变性，炎性细胞浸润和灶性坏死等。 高浓度臭氧注入猪蛛网