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指植物的离体部分,在人工控制的条件下,发育成完整植株的技术。 什么叫细胞分化?其实质是什么? 什么叫脱(去)分化、再分化? 愈伤组织的细胞有什么特点? 如何控制细胞的脱分化与去分化? · (二)影响植物组织培养的因素 不同植物激素使用顺序 不同植物激素使用比例 * 萧县郝集中学 萧县郝集中学 又称:植物离体培养 植物组织培养的概念 植物组织培养的原理是什么? 植物细胞的全能性 思考: 概念:指已分化的细胞具有发育成完整个体的潜能。 原因:生物体的每一个细胞都含有该物种的全套遗传物质。 阅读32页解决下列问题: (一)植物组织培养的基本过程 基因的选择性表达 基础知识 愈伤组织 植物组织培养的流程图 植物组织 形成愈伤组织 长出丛芽 生根 移栽成活 脱分化 再分化 再分化 移栽 (去分化) 1、植物材料(外植体)的选择 2、培养基的配制 3、不同植物激素使用顺序 4、不同植物激素用量比例 5、pH、温度、光照 6、消毒 未开花植物的茎上部新萌生的侧枝 MS培养基 分化频率提高 同时使用 细胞既分裂也分化 先细胞分裂素, 后生长素 有利于细胞分裂但不分化 先生长素, 后细胞分裂素 实验结果 使用顺序 促进愈伤组织生长 比值适中 促芽分化, 抑根形成 比值低时 促根分化, 抑芽形成 比值高时 结果 生长素/细胞分裂素比值 思考:以下培养基出现的现象反应了什么问题? pH、温度、光照(菊花组培) pH=5.8 温度控制在18—22℃ 每日光照12h 消毒 在培养的整个过程中,都需要是一个无菌环境。 制备MS固体培养基 外植体消毒 接种 培 养 栽 培 移 栽 实验操作 冲洗—酒精—无菌水冲洗—氯化汞—无菌水冲洗至少三次之上 不要倒插 1.配制各种母液 2.配制培养基 3.灭菌 将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间,等幼苗长壮后再移栽到土壤中 植物组织培养过程中,哪些可能带菌?如何灭菌? A. 操作者双手 B. 外植体 C. 培养基 D. 接种用的解剖刀,镊子等 E. 接种室 -------高压蒸汽灭菌 ------酒精、氯化汞 -----------酒精 -----酒精、酒精灯灼烧 -----------紫外灯 结果分析与评价 菊花的组织培养 基本原理: 基本过程: 影响因素: 操作流程: 课堂小结 * * * 萧县郝集中学 萧县郝集中学
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